培養(yǎng)方法與步驟：
①動(dòng)物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時(shí)間不能過(guò)長(zhǎng)、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無(wú)菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進(jìn)行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過(guò)毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí)，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來(lái)），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁，并開始生長(zhǎng)。如果無(wú)污染且細(xì)胞生長(zhǎng)良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來(lái)的橘紅色變成黃色，此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長(zhǎng)成致密單層細(xì)胞，這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
豬心肌成纖維細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來(lái)源
心臟組織
生長(zhǎng)特性
貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞形態(tài)
長(zhǎng)梭狀細(xì)胞
分類
豬原代細(xì)胞
貨號(hào)
A01X2255
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
細(xì)胞特性：
1）組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常心臟組織。
2)細(xì)胞鑒定：纖維連接蛋白（Fibronectin）或波形蛋白（Vimentin）熒光染色為陽(yáng)性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式：長(zhǎng)梭狀細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 Delf原代成纖維細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
心臟是脊椎動(dòng)物身體中重要的一個(gè)器官，主要功能是提供壓力，把血液運(yùn)行至身體各個(gè)部分。心臟的作用是推動(dòng)血液流動(dòng)，向器官、組織提供充足的血流量，以供應(yīng)氧和各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，并帶走代謝的終產(chǎn)物（如二氧化碳、無(wú)機(jī)鹽、尿素和尿酸等），使細(xì)胞維持正常的代謝和功能。
心臟中，心肌成纖維細(xì)胞約占正常心肌組織細(xì)胞總數(shù)的 60%-70%，是心臟中非心肌細(xì)胞的主要組成部分，廣泛存在于心臟組織中，包圍心肌細(xì)胞，連接心肌細(xì)胞間質(zhì)，與缺血性心臟病、炎癥、肥大、梗死等病理狀態(tài)密切相關(guān)。
公司正在出售的產(chǎn)品：
ACPELISAKit
大鼠穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)elisa分析檢測(cè)試劑盒
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人甲狀腺素抗體(TAb)elisa分析檢測(cè)試劑盒
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組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶SMYD2抗體 Anti-SMYD2
酸性核糖體磷蛋白大亞基P0抗體 Anti-RPLP0
軸突生長(zhǎng)誘向因子G1配體抗體 Anti-Netrin G1 ligand
鋅指蛋白93抗體 Anti-ZNF93
植物活性氧(ROS)elisa分析檢測(cè)試劑盒
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人促腎上腺皮質(zhì)(ACTH)elisa分析檢測(cè)試劑盒
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蛋白酶抑制劑混合物片劑（EDTA Free）1片
細(xì)胞RUNX3蛋白表達(dá)比色法定量檢測(cè)試劑盒
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大鼠5'-AMP活化蛋白激酶α-2催化亞基(PRKAA2)elisa分析檢測(cè)試劑盒
利鈉肽受體A抗體
Natriuretic Peptide Receptor A
口蹄疫病毒VP1抗體
FMDV VP1
瞬時(shí)受體電位離子通道蛋白4抗體（M亞家族） Anti-TRPM4
磷酸化核糖體S6K2蛋白激酶抗體 Anti-phospho-P70 S6 Kinase beta 2 (Ser370)
癌基因蛋白抑瘤素M抗體 Anti-Oncostatin M
平滑肌肌球蛋白重鏈抗體 Anti-SMMHC/Myosin
Cy5標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈
豬心肌成纖維細(xì)胞Rabbit Anti-Goat IgM / Gold
鋅指蛋白143抗體
65 kDa glutamic acid decarboxylase; DCE 2; DCE2; GAD 2; GAD 65; GAD-2; GAD-65; GAD2; Glutamate Decarboxylase 2 (pancreatic islets and brain 65kDa); Glutamate Decarboxylase 2; Glutamate Decarboxylase 65; Glutamate decarboxylase 65 kDa isoform; Glutamic Acid Decarboxylase 2; Glutamic Acid Decarboxylase 65.
豬心肌成纖維細(xì)胞
大鼠大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞
NCI-H1793人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞
小鼠肝癌細(xì)胞德國(guó)引進(jìn)；hep-53.4
原代細(xì)胞步驟：
1. 在無(wú)菌條件下的冰上對(duì)新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無(wú)菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來(lái)定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí)，用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。