
培養(yǎng)方法與步驟:
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內,影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺內進行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結締組織盡可能去除,然后將肝組織反復剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉,使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細胞接種后一般幾個小時內即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細胞生長良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細胞,這時可進行傳代培養(yǎng)。
產品名稱
小鼠肺巨噬細胞
產品規(guī)格
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
組織來源
肺組織
生長特性
貼壁培養(yǎng)
細胞形態(tài)
圓形
分類
小鼠原代細胞
貨號
A01X1770
用途
僅供科研實驗
細胞特性:
1)組織來源于實驗動物小鼠的正常肺組織。
2)細胞鑒定:CD68或MAC387熒光染色為陽性。
3)經鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細胞生長方式:圓形,不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 原代 巨噬 細胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細胞簡介:
肺巨噬細胞由單核細胞分化而來,廣泛分布在肺間質內,在細支氣管以下的管道周圍和肺泡隔內較多。肺巨噬細胞的吞噬、和分泌作用都十分活躍,有重要防御功能。
吸入空氣中的塵粒、等異物進入肺泡和肺間質,多被巨噬細胞吞噬,故細胞胞質內常見塵粒、等物進入肺泡和肺間質,多被巨噬細胞吞噬,故細胞胞質內常見塵粒、次級溶酶體及吞噬體等。
肺巨噬細胞還可吞噬衰老的紅細胞,在心力衰竭患者出現肺瘀血時,大量紅細胞從溢出,被巨噬細胞吞噬。吞噬異物的巨噬細胞,有的從肺泡腔經呼吸道粘液流動和纖毛運動而被咳出,有的進入肺管隨進入肺結內。
公司正在出售的產品:
組織可溶性總核蛋白制備試劑盒
MCF2變換序列樣蛋白2抗體
MCF2L2
19號染色體開放閱讀框77抗體
C19orf77
植物酶(glutaminase)活性比色法定量檢測試劑盒
人低密度脂蛋白受體相關蛋白5(LRP-5)elisa分析檢測試劑盒
大鼠封閉蛋白4(CLDN4)elisa分析檢測試劑盒
二糖酶測試盒 測蔗糖酶Sucrase 50管/24樣 比色法
程序性細胞死亡2樣抗體
PDCD2L
卷曲螺旋結構域蛋白114抗體
CCDC114
磷酸化轉錄因子3抗體 Anti-phospho-TCF3/E47/E2A(Thr355)
多腺苷二磷酸多聚酶4抗體/多聚ADP-核糖聚合酶4 Anti-PARP4
腺苷酸硫酸激酶1抗體 Anti-PAPSS1
5-羥色胺受體2C抗體 Anti-5HTR2C
FITC標記的兔抗羊IgG H&L
Rabbit Anti-Goat IgG H&L / FITC
eIF4E結合蛋白2抗體
eI4EBP2
鋅指蛋白471抗體 Anti-ZNF471
嗜中性粒細胞胞漿因子1抗體 Anti-NCF1/p47 phox
mTOR相關調控蛋白抗體 Anti-Raptor
溴化丙胺太林相關蛋白2抗體 Anti-STOML2/SLP2
大鼠Ⅴ型膠原(Col Ⅴ)elisa分析檢測試劑盒
小鼠肺巨噬細胞Mouse IgG / AF647
mRNA cap甲基轉移酶抗體
Cytochrome p450 19A1; Estrogen synthetase; ARO 1; ARO; ARO1; CPV; CYPXIX; Cytochrome P450 family 19 subfamily A polypeptide 1; MGC104309; P 450AROM; P450AROM; CP19A_HUMAN; Cytochrome P-450AROM; CPV1; CYAR; CYP19; Cyp19a1; Cytochrome P450, family 19, subfamily A, polypeptide 1; Cytochrome P450, subfamily XIX (aromatization of androgens); Flavoprotein linked monooxygenase; Microsomal monooxygenase; OTTHUMP00000162543; OTTHUMP00000198350; P 450AROM.
小鼠肺巨噬細胞
大鼠腎周細胞
馬-達二氏犬腎細胞系;MDCK(NBL-2)
WPMY-1人正常前列腺基質永生化細胞
原代細胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時間根據腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細胞濾網過濾細胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。