
培養(yǎng)方法與步驟:
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi),影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺內(nèi)進行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除,然后將肝組織反復剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn),使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細胞生長良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細胞,這時可進行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
兔心室心肌細胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
組織來源
心臟組織
生長特性
貼壁培養(yǎng)
細胞形態(tài)
柱狀細胞
分類
兔原代細胞
貨號
A01X2020
用途
僅供科研實驗
細胞特性:
1)組織來源于實驗動物的正常心臟組織。本細胞為終末分化細胞,增殖能力很弱,建議客戶收到細胞后直接用于后續(xù)實驗,不要進行擴增培養(yǎng)。
2)細胞鑒定:肌球蛋白重鏈(Myosin heavy chain)熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細胞生長方式:柱狀細胞,不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 DELF 原代心肌細胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細胞簡介:
心臟壁主要由心肌構(gòu)成,心室壁比心房壁厚,其中,左心室比右心室壁厚,在心臟的四個腔中,左心室的心肌。心肌的工作細胞包括心房肌和心室肌。心肌細胞為短柱狀,一般只有一個細胞核,心肌細胞之間有閏盤結(jié)構(gòu)。心房與心室的心肌層不直接相連,它們分別起止于心房和心室交界處的纖維支架,形成各自獨立的肌性壁,從而保證心房和心室各自進行獨立的收縮舒張,以推動血液在心臟內(nèi)的定向流動。臨床研究表明,心肌病是一組異質(zhì)性心肌,表現(xiàn)為心室不適當?shù)姆屎窕驍U張,可引起心血管性死亡或進展性心力衰竭。
公司正在出售的產(chǎn)品:
/酵母堿性焦磷酸酶(Alkaline Pyrophosphatase)活性比色法定量檢測試劑盒
細胞CREB蛋白表達比色法定量檢測試劑盒
依諾沙星殘留ELISA測試盒(殘留)
通用型ECL化學發(fā)光顯影試劑盒
小鼠二氫硫辛酸脫氫酶(DLD)elisa檢測試劑盒
組織短鏈脂酰脫氫酶(ACYL COA DEHYDROGENASE)活性比色法定量檢測試劑盒
人白介素2elisa檢測試劑盒
大鼠補體蛋白4(C4)elisa檢測試劑盒
小鼠氧化型低密度脂蛋白(OxLDL)elisa檢測試劑盒
磷酸化轉(zhuǎn)錄因子3抗體 phospho-TCF3 (Ser39)
硫酸乙酰肝素蛋白多糖2抗體 HSPG2/Heparan Sulfate Proteoglycan 2
ENAH蛋白抗體 ENAH
FAM195B蛋白抗體 FAM195B
鋅指蛋白913抗體 zbtb11
胸腺素抗體 Thymulin
促黃體**素受體抗體 LHR
蛋氨酸合成酶MTR抗體 MTR
絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶ICK抗體 ICK
絲裂原活化蛋白激酶相互作用蛋白2抗體 JIP2
PE標記大鼠CD8a單克隆抗體 Rat CD8a/PE
PE標記小鼠FOXP3單克隆抗體 Mouse FOXP3/PE
14-3-3 Theta重組兔單克隆抗體 14-3-3 Theta
1號染色體開放閱讀框31抗體 C1orf31
環(huán)指蛋白207抗體 RNF207
雞白痢、雞傷寒菌抗體 Salmonella gallinarum
小鼠5羥色胺受體2A(5-HTR 2A)elisa檢測試劑盒
兔心室心肌細胞Rabbit Anti-Guinea Pig IgM / AP
肉瘤抗原1抗體
Candidate of metastasis 1; COM1; Nuclear protein 1; NUPR1; NUPR1_HUMAN; p8 protein; Protein p8.
兔心室心肌細胞
大鼠心房心肌細胞
小鼠口腔鱗狀細胞癌(OSCC)細胞系;moc1
THLE-2人正常肝細胞
原代細胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時間根據(jù)腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細胞濾網(wǎng)過濾細胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。