
培養(yǎng)方法與步驟:
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi),影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺內(nèi)進行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除,然后將肝組織反復剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn),使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細胞生長良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細胞,這時可進行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
兔腎上皮細胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
組織來源
動物腎組織
生長特性
貼壁培養(yǎng)
細胞形態(tài)
圓形 多角形細胞
分類
兔原代細胞
貨號
A01X2097
用途
僅供科研實驗
細胞特性:
1)細胞來源于動物正常腎組織。
2)廣譜角蛋白(PCK)或細胞角蛋白-19(CK-19)熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細胞生長方式:圓形,多角形細胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 DELF 原代上皮細胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細胞簡介:
腎是脊椎動物的一種器官,屬于泌尿系統(tǒng)的一部分,負責過濾血液中的雜質(zhì)、維持體液和電解質(zhì)的平衡,后產(chǎn)生尿液經(jīng)尿道排出體外;同時也具備的功能以調(diào)節(jié)血壓。用顯微鏡觀察,可見到每一個腎臟主要由約 100萬個具有相同結(jié)構(gòu)與機能的腎單位和少量結(jié)締組織所組成,其間有大量血管和神經(jīng)纖維。
公司正在出售的產(chǎn)品:
豚鼠腎素(Renin)elisa檢測試劑盒
人白介素5受體alpha(IL5RA)elisa檢測試劑盒
細胞PKCη激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
小鼠神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)elisa分析檢測試劑盒
大鼠饑餓(GHRL)elisa分析檢測試劑盒
動物多酚氧化酶(polyphenol oxidase;PPO)活性比色法定量檢測試劑盒
人s腺苷型半胱氨酸(SAH)elisa檢測試劑盒免費代測
大鼠白蛋白啟動子D位點結(jié)合蛋白(DBP)elisa檢測試劑盒
小鼠髓細胞觸發(fā)受體1(TREM1)elisa檢測試劑盒
APC標記小鼠CD107b單克隆抗體 mouse CD107b/APC
BADH2(水稻)抗體 BADH2
跨膜蛋白132D抗體 TMEM132D
蛋白激酶SgK223抗體 PRAGMIN/Sgk223
X染色體開放閱讀框31抗體 CXorf31
β淀粉樣蛋白前體結(jié)合蛋白B-1抗體 APBB1 interacting protein 1
細胞毒性T細胞抗原-4(CD152)抗體 CTLA4
細胞角蛋白86抗體 KRT86
Kelch樣蛋白17抗體 KLHL17
LEPREL1蛋白抗體 LEPREL1
驅(qū)動蛋白結(jié)合蛋白1抗體 TRAK1
熱休克蛋白82抗體 HSC82
甘胺酸-N-?;D(zhuǎn)移酶樣1抗體 GLYATL1
干擾素誘導的三角形四肽重復蛋白1抗體 IFIT1
早老素蛋白-2抗體 presenilin 2
脂肪源性胰島素增敏因子抗體 C1QTNF12
大鼠白介素15(IL15)elisa檢測試劑盒
兔腎上皮細胞Goat Anti-Chicken IgG H&L / RBITC
高嗜酸性粒細胞綜合癥相關(guān)蛋白FIP1L1抗體
Kcnd1; KCND1_HUMAN; Kv4.1; mShal; Potassium voltage gated channel Shal related subfamily member 1; Potassium voltage gated channel subfamily D member 1; Potassium voltage-gated channel subfamily D member 1; Shal type potassium channel; Voltage gated potassium channel Kv4.1; Voltage gated potassium channel subunit Kv4.1; Voltage-gated potassium channel subunit Kv4.1.
兔腎上皮細胞
大鼠眼外肌成纖維細胞
小鼠垂體瘤細胞;GT1.1 /GT1-1 (種屬鑒定)
SW48人結(jié)腸腺癌細胞
原代細胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時間根據(jù)腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細胞濾網(wǎng)過濾細胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。