
培養(yǎng)方法與步驟:
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi),影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺內(nèi)進(jìn)行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進(jìn)行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除,然后將肝組織反復(fù)剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn),使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標(biāo)記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細(xì)胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細(xì)胞生長良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細(xì)胞,這時可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
人膽囊成纖維細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來源
膽囊組織
生長特性
貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞形態(tài)
長梭形
分類
人原代細(xì)胞
貨號
A01X1308
用途
僅供科研實驗
細(xì)胞特性:
1)細(xì)胞來源于人正常膽囊組織。
2)細(xì)胞鑒定:波形蛋白(Vimentin)熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長方式:長梭形,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 Delf原代成纖維細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細(xì)胞簡介:
膽囊,是位于右方肋骨下肝臟后方的梨形囊袋構(gòu)造,有濃縮和儲存膽汁之作用。膽囊壁由粘膜、肌層和外膜三層組成。其中,外膜層主要由成纖維細(xì)胞構(gòu)成。
公司正在出售的產(chǎn)品:
豬白介素2(IL-2)elisa分析檢測試劑盒
鉀離子通道蛋白16抗體
KCNK16
細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶樣3抗體
CDKL3/NKIAMRE
RAN結(jié)合蛋白2/核孔蛋白抗體 Anti-RanBP2
環(huán)指蛋白10抗體 Anti-RNF10
磷酸化T細(xì)胞激活核轉(zhuǎn)錄因子4抗體 Anti-phospho-NFATC4 (Ser168 + Ser170)
鋅指蛋白206抗體 Anti-ZNF206
肌球蛋白輕鏈激酶2抗體
MYLK2
鐵螯合酶抗體
FECH
Tau微管蛋白激酶2抗體 Anti-TTBK2/SCA11
組織相容性復(fù)合物RTF1抗體 Anti-RTF1
跨膜受體蛋白Notch-1抗體 Anti-Notch1/MOTC
肌聚多糖-β抗體 Anti-SGCB/SGC
β淀粉樣肽 1-40(C端)抗體
beta-Amyloid 1-40(CT)
神經(jīng)損傷誘導(dǎo)蛋白2/NINJ2抗體
Ninjurin 2
基質(zhì)細(xì)胞衍生因子4抗體(鈣結(jié)合蛋白) Anti-SDF4
中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶ELANE抗體 Anti-Neutrophil Elastase/ELANE
G蛋白P21 RAC2抗體 Anti-RAC2
脂滴相關(guān)蛋白TIP47抗體 Anti-TIP47/M6PRBP1
大鼠蛋白激酶G(PKG)elisa分析檢測試劑盒
人膽囊成纖維細(xì)胞Rabbit Anti-Human IgG F(ab')? / Gold
鋅指蛋白10抗體
Ataxin 7 like 4; Ataxin 7 like protein 1; Atxn7l4; MGC28883; RGD1564242; FLJ40255; FLJ58242; KIAA1218; mCG_142289; MGC10760; MGC33190; tcag7.1150; 2810423G08Rik; AT7L1_HUMAN.
人膽囊成纖維細(xì)胞
人胎盤周細(xì)胞
QBC939(膽管癌細(xì)胞)
NCI-H1341人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞
原代細(xì)胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時間根據(jù)腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。