細胞簡介：
小鼠胰腺星狀細胞分離自胰腺組織；胰腺分為外分泌腺和腺兩部分。外分泌腺由腺泡和腺管組成，腺泡分泌胰液，腺管是胰液排出的通道。胰液中含有、胰蛋白酶原、脂肪酶、淀粉酶等。胰液通過胰腺管排入十二指腸，有消化蛋白質(zhì)、脂肪和糖的作用。腺由大小不同的細胞團──胰島所組成，胰島主要由4種細胞組成：α細胞、β細胞、γ細胞及PP細胞。α細胞分泌胰高血糖素，升高血糖；β細胞分泌胰島素，降低血糖；γ細胞分泌，以旁分泌的方式抑制α、β細胞的分泌；PP細胞分泌胰多肽，抑制胃腸運動、胰液分泌和膽囊收縮。纖維化是慢性胰腺炎的典型病理特征，活化的胰腺星狀細胞（PSC）是胰腺纖維化的主要效應(yīng)細胞，PSC分離和成功培養(yǎng)是體外研究胰腺纖維化的重要前提。未活性化的PSC胞漿中富含維A脂滴，并表達Desmin蛋白，活化后的PSC則表達α-平滑肌肌動蛋白（alpha-SMA）。PSC具有靜息態(tài)與激活態(tài)兩種，并分別具有特異的標(biāo)志物。靜息狀態(tài)PSC胞質(zhì)內(nèi)富含的維生素A脂滴可以被油紅O染成紅色，陽性表達Desmin。激活狀態(tài)PSC陽性表達alpha-SMA。油紅O染色發(fā)現(xiàn)，原代分離的細胞培養(yǎng)6d，胞漿中仍可見明顯的脂滴，傳代后，橙紅色的脂滴顆粒顯著減少甚至消失。細胞化學(xué)染色顯示，細胞接種24h仍然表達Desmin，48h后Desmin基本不再表達。培養(yǎng)48h后絕大多數(shù)細胞開始表達alpha-SMA，隨著培養(yǎng)時間的增長和傳代次數(shù)的增加，細胞表達alpha-SMA，而不再表達Desmin，說明細胞活化。提示PSC接種24h后即啟動了激活過程，至培養(yǎng)第6d大多數(shù)細胞激活，傳代后細胞處于高度激活狀態(tài)。原代胰腺星狀細胞可作為慢性胰腺炎新藥的細胞篩選模型，目前研究發(fā)現(xiàn)：胰腺受損時，在各種刺激因子作用下使胰腺星狀細胞活化，導(dǎo)致細胞形態(tài)、功能發(fā)生變化，促使基質(zhì)增生、膠原蛋白的大量**及不規(guī)則沉積。
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組織來源 |
產(chǎn)品規(guī)格 |
貨號 |
用途 |
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胰腺組織 |
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 |
A01X1855 |
僅供科研研究實驗 |
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳3-5代左右
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
方法簡介：
公司實驗室分離的小鼠胰腺星狀細胞采用膠原酶制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實驗室分離的小鼠胰腺星狀細胞經(jīng)α-SMA、Desmin熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
實驗具體步驟：
（1）動物福利：小鼠麻醉犧牲/處死，或者斷頸處死；
（2）小鼠：可以將小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次，或者簡單粗暴的使用75%乙醇在燒杯中浸泡3min，然后轉(zhuǎn)移至無菌操作臺使用無菌吸水紙/棉花將酒精擦拭干凈；
（3）取出心臟組織：用眼科剪在鑷子的配合下打開腹腔，取出心臟組織，置于含有2X雙抗冰冷PBS的培養(yǎng)皿中；
（4）組織：在含有2X雙抗PBS中將心臟一分為二，充分洗滌里邊的血液，/3次，每次5min；
（5）破碎組織：使用眼科鉗或者剪刀，將心臟組織剪碎至1-3 mm3大小組織塊；（備注：如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml膠原酶Ⅰ于37℃聯(lián)合消化組織3-5 min，
利于后期細胞從組織塊中爬出來，同時能夠消除部分結(jié)締組織等）
（6）種植組織塊：將上述組織使用2X雙抗冰冷PBS洗滌3次，每次5min，然后使用完全培養(yǎng)基（含有1X雙抗）洗滌一次。經(jīng)過的心臟破碎組織塊經(jīng)過離心后，可以用細頭
鑷子將組織塊種植于培養(yǎng)皿中（備注：破碎組織塊可能還含有液體，可以在一個無菌培養(yǎng)皿底沾幾下，把液體）；種植完成后，可以將培養(yǎng)皿正置3-5小時，然后更換培養(yǎng)皿的
蓋子正置放置過夜（也可以使用封口膜密閉培養(yǎng)皿在4℃正置過夜）；
（7）培養(yǎng)基培養(yǎng)：將組織塊中輕柔緩慢的加入完全培養(yǎng)基，然后在恒溫潮濕細胞培養(yǎng)箱（37℃，5% CO2）培養(yǎng)48h后觀察單個細胞從組織塊中爬出情況，一般3-5 day能夠達到傳代的爬出效率；
（8）貼壁細胞傳代：當(dāng)單個細胞從組織塊爬出面積在組織塊3-5倍，進行傳代，此時可以使用0.25% or 1/3 0.25% 胰蛋白酶消化組織塊爬出的細胞，消化時間根據(jù)正常細胞消化時間即可，當(dāng)然可以在消化過程中不斷管擦爬出細胞的皺縮情況，一旦達到消化完成（皺縮細胞≥70%）即可使用完全培養(yǎng)基終止消化。在吹打單個細胞時候，一定要輕柔/緩慢，不能吹打到組織塊，如果組織塊掉下來，大概率是不會再貼壁成功啦。根據(jù)細胞數(shù)量種植到對應(yīng)的培養(yǎng)皿/瓶中；
（9）鑒定：細胞在傳代至代、第五代、第十代時候可以將部分細胞進行鑒定，鑒定辦法包括：RNA-seq、western blot、qRT-PCR、RT-PCR、IF、流式細胞術(shù)等。實驗方法:
一、懸浮細胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，可采用低速離心。經(jīng)離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細胞。
二、實體組織材料的分離方法
對于實體組織材料，由于細胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細胞充分分散，形成細胞懸液，可采用機械分散法（物理裂解）和消化分離法。其中，機械分散法的特點是簡便、快速，但對組織機械損傷大，而且細胞分散效果差，適用于處理纖維成分少的軟組織。消化分離法是指把組織剪切成較小團塊（或糊狀），應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進一步使細胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動，使團塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細胞團塊得以較充分的分散，制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液，接種培養(yǎng)后，細胞容易貼壁生長。
公司正在出售的產(chǎn)品：
MouseKlothoELISAKit
石斑魚卵黃蛋白原(VTG)elisa分析檢測試劑盒
VTG ELISA Kit
人白介素-21(IL-21)elisa分析檢測試劑盒
HumanIL-21ELISAKit
細胞/組織線粒體DNA萃取試劑盒
大鼠細胞功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)elisa檢測試劑盒
細胞中鏈酮脂酰硫解酶（KETOACYL COA THIOLASE）活性比色法定量檢測試劑盒
NAD激酶NADK測試盒 50T/24樣 比色法
LSM4蛋白抗體
LSM4
細胞色素P450 A43抗體
CYP3A43
三磷酸腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運蛋白G超家族成員8抗體 Anti-STSL/ABCG8
環(huán)指蛋白130抗體 Anti-RNF130
鈉鉀離子轉(zhuǎn)運蛋白1抗體 Anti-NKCC1
鋅指蛋白ZBTB6抗體 Anti-ZBTB6/ZNF482
精子細胞成熟蛋白1抗體
SPEM1
微小染色體維持缺陷蛋白9抗體
MCM9
SUGT1蛋白抗體 Anti-SUGT1
磷酸化丙酮酸脫氫酶α1抗體 Anti-phospho-PDHA1(Ser293)
血小板源性生長因子A抗體 Anti-PDGF-A
Toll樣受體2抗體 Anti-TLR2/CD282
PE-Cy5.5標(biāo)記大鼠IgG（型對照)
小鼠胰腺星狀細胞Rat IgG / PE-Cy5.5
7跨膜蛋白超家族成員1抗體
26S proteasome non-ATPase regulatory subunit 6; 26S proteasome regulatory subunit RPN7; 26S proteasome regulatory subunit S10; Breast cancer-associated protein SGA-113M; KIAA0107; p42A; P44S10; PFAAP4; PSMD6_HUMAN; Phosphonoformate immuno-associated protein 4; Proteasome (prosome, macropain) 26S subunit, non-ATPase, 6; Proteasome regulatory particle subunit p44S10; Rpn7; S10 antibody SGA-113M.
小鼠真皮毛細胞
兔結(jié)膜成纖維細胞
大鼠皮膚成纖維樣細胞；RS1；RS1
KYSE-30人食管鱗狀細胞癌細胞