產(chǎn)品名稱：馬-達二氏犬腎細胞系；MDCK(NBL-2)

商品屬性：

細胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細胞：以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細胞及細胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進行細胞計數(shù)。
b、根據(jù)細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液，使細胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細胞懸液，注意凍存管做好標識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

商品詳情：

細胞別稱；MDCK；犬腎細胞

種屬來源；狗

年齡性別；雌性，成年

組織來源；腎

生長特性；貼壁生長

細胞形態(tài)；上皮細胞樣

細胞代數(shù)；10代以內(nèi)

背景介紹；MDCK細胞系源自一只雌性英國可卡犬的腎臟組織，由S.H. Madin and N.B. Darby于1958年建立。該細胞為角蛋白陽性細胞。

使用權(quán)限；A類

細胞規(guī)格；1x106cells/T25或1mL凍存管

支原體檢測；無

培養(yǎng)基；MEM(ATCC改良）+10%FBS+PS

培養(yǎng)條件；氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃

凍存條件；無血清凍存液，液氮儲存

INPP5F       4號染色體開放閱讀款

C4orf45       冰凍切片組織IP3R受體蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒

甲酸含量測試盒       磷酸肌醇磷酸酶蛋白INPP5抗體

小鼠可溶性CD30配體(sCD30L)elisa分析檢測試劑盒       腦蛋白239抗體

EI2BL/MRI1       酮基移換酶樣蛋白1抗體  Anti-TKTL1

犬P選擇素(SELP)elisa分析檢測試劑盒       大鼠11β羥類固醇脫氫酶1型(11β-HSD1)elisa檢測試劑盒

MPPED2      EI2BL/MRI1蛋白抗體

磷酸化原癌基因酪氨酸蛋白激酶受體RET抗體  Anti-phospho-Ret/HSCR1(Tyr1062)       孤菲肽/痛敏肽抗體  Anti-NociceptinUBE2A       粒細胞相關(guān)分化標志物樣蛋白2抗體

染色質(zhì)修飾蛋白CHMP7抗體       CHMP7

膽固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白2抗體  Anti-SREBP-2       泛素結(jié)合酶E2蛋白A抗體

MYADML2       雌調(diào)節(jié)蛋白LIV1/鋅轉(zhuǎn)運蛋白抗體  Anti-LIV-1/SLC39A6

Nemo樣激酶抗體  Anti-Nemo-like kinase       磷酸化P21蛋白激活的蛋白激酶6  Anti-phospho-PAK6(Ser165)

轉(zhuǎn)錄增強因子TEF4抗體  Anti-TEF4/TEA domain family member 2       大鼠肝細胞生長因子激活物(HGFA)elisa分析檢測試劑盒

馬-達二氏犬腎細胞系；MDCK(NBL-2)HGFA ELISA Kit       豚鼠鉤端螺旋體IgG(Leptospira)elisa分析檢測試劑盒

KIN17抗體       KIN17

細胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當顯微鏡下細胞形態(tài)和生長密度達到90%時，進行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細胞，吹打細胞使其均勻分散。
（7）吸棄細胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。
（9）細胞凍存。