產(chǎn)品名稱：狗腎細(xì)胞；Super Tube

商品屬性：

細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

商品詳情：

生長(zhǎng)特性 貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

生長(zhǎng)培養(yǎng)基 DMEM/F12＋0.05mM NEAA＋10% FBS＋1% P/S

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

推薦傳代比例 1:3-1:4

推薦換液頻率 2~3次/周

背景描述 從表觀正常的成年雌性可卡犬中建立了細(xì)胞株MDCK，從中克隆建立了狗上皮樣細(xì)胞株Super Tube細(xì)胞。當(dāng)維持高細(xì)胞濃度時(shí)，Super Tube細(xì)胞形成大量的小管(據(jù)報(bào)道，24孔板的每孔鋪7×10^5細(xì)胞，3天內(nèi)就能形成小管)。要形成小管，Super Tube細(xì)胞需要每天兩次換液以提供足夠養(yǎng)分。與原始細(xì)胞株相比，Super Tube細(xì)胞的c-AMP的檢測(cè)水平低得多，在毛喉su刺激下讀出的腺苷環(huán)化酶水平也低；Super Tube細(xì)胞的跨上皮抗性也比Super Dome和MDCK都低。

年齡（性別） 雌；成年

組織來源 正常腎

細(xì)胞類型 自發(fā)永生化細(xì)胞

生物等級(jí) 1

保藏機(jī)構(gòu) ATCC; CRL-2285

MCC       DIM-7蛋白抗體

DIM-7       正苯基萘胺攝入法膜損傷熒光檢測(cè)試劑盒

通用型李屬壞死環(huán)斑病毒（Prunus Necrotic Ringspot Virus；PNRSV）       大腸癌腫瘤突變蛋白抗體

細(xì)胞脂質(zhì)過氧化物亞油酸（linoleic acid）細(xì)胞流式分析試劑盒       PCID1蛋白抗體

Homeo box C10       TRAF2和NCK激酶相互作用蛋白抗體  Anti-TNIK

豚鼠乙型肝炎病毒表面抗體(HBsAb)elisa分析檢測(cè)試劑盒       大鼠腎素(Renin)elisa檢測(cè)試劑盒

PCID1      源盒蛋白C10抗體

腦特異性多肽蛋白19抗體  Anti-PCP4/PEP-19       孤兒核受體PAR1抗體  Anti-PXRRabbit Anti-Horse IgG H&L / PE-Cy5.5       磷酸化原癌蛋白CBL2抗體

缺氧誘導(dǎo)因子脯氨酰羥化酶4抗體       HIF Prolyl Hydroxylases

跨膜蛋白SEMA4A抗體  Anti-SEMA4A       PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗馬IgG H&L

phospho-CBL (Tyr731)       磷酸化ZCWCC1抗體  Anti-phospho-ZCWCC1 (Ser739)

利鈉肽受體C抗體  Anti-NPRC/Natriuretic Peptide Receptor C       磷酸化核糖體S6激酶RSK2抗體  Anti-Phospho-RSK2 (Ser227)

短鏈L-3羥烷基輔酶A脫氫酶抗體  Anti-SCHAD/HADHSC       大鼠8-異構(gòu)前列腺素F2α(8-epi-PGF2α)elisa分析檢測(cè)試劑盒

狗腎細(xì)胞；Super Tube8-epi-PGF2α ELISA Kit       人甘露糖結(jié)合蛋白/甘露糖結(jié)合凝集素(MBP/MBL)elisa分析檢測(cè)試劑盒

原鈣粘附蛋白17抗體       PCDH17

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
（9）細(xì)胞凍存。