產(chǎn)品名稱：sv-huc-1人膀胱上皮永生化細(xì)胞

商品屬性：

細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

商品詳情：

生長特性 貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)方案A（默認(rèn)）

生長培養(yǎng)基:

Ham's F-12K＋10% FBS＋1% P/S

培養(yǎng)條件:

氣相：空氣，95%；CO2，5%, 溫度：37℃

推薦傳代比例 1:2-1:4

推薦換液頻率 2-3次/周

注意事項 該細(xì)胞較難消化，注意延長消化時間，消化到細(xì)胞收縮變圓，輕拍培養(yǎng)瓶側(cè)邊，細(xì)胞可以滑落方可終止消化。

參考資料(來源文獻(xiàn))

背景描述 SV-HUC-1細(xì)胞是正常輸尿管組織用SV40病毒轉(zhuǎn)染建株的。反復(fù)用非洲綠猴腎細(xì)胞平板測試檢測傳染性SV40的**，結(jié)果都呈陰性；SV-HUC-1細(xì)胞在脅迫(如曝露于化學(xué)試劑)下可能激活病毒。

年齡（性別） 男性；11歲

組織來源 輸尿管，輸尿管上皮

細(xì)胞類型 轉(zhuǎn)化細(xì)胞系

生物等級 BSL-2

致瘤性 No, nude mice.

基因表達(dá)情況 uroepithelial keratins; SV40 T antigen

保藏機(jī)構(gòu) ATCC; CRL-9520

增強(qiáng)型ECL化學(xué)發(fā)光檢測試劑盒200ml       人鈣網(wǎng)蛋白(CRT)elisa分析檢測試劑盒

（HAT+潮）       RIPA裂解液（蛋白裂解液）100ml

超氧陰離子測試盒       大鼠抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體(AECA)elisa檢測試劑盒

大鼠Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)elisa檢測試劑盒       卵黃狀黃斑病蛋白3抗體 Bestrophin 3

FITC標(biāo)記大鼠CD4單克隆抗體 Rat CD4/FITC       嗅覺受體51I2抗體 OR51I2

載玻片細(xì)胞RUNX3蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒       小鼠白三烯D4(LTD4)elisa分析檢測試劑盒

膜蛋白CLDND2抗體 CLDND2      FAM55A蛋白抗體 FAM55A

血紅蛋白δ抗體 Hemoglobin subunit delta       蛋白激酶B抗體 AKT1糖蛋白GNTVA抗體 MGAT5       PRA1蛋白抗體 PRA1/PRAF1

ECT2L蛋白抗體       ECT2L

蛋白質(zhì)磷酸酶1G抗體 PPM1G       四分子交聯(lián)體1抗體（四旋蛋白） TSPAN1

RASGEF1C蛋白抗體 RASGEF1C       2，4-二氯苯氧乙酸(除草劑)單克隆抗體 2,4-D(24D1)

3號染色體開放閱讀框33抗體 C3orf33       肌球蛋白1B抗體 MYO1B

受體相關(guān)蛋白1抗體 PVRL1       組織C-KIT激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）

sv-huc-1人膀胱上皮永生化細(xì)胞人TGF-β誘導(dǎo)早期基因1(TIEG1)elisa分析檢測試劑盒       大鼠白介素10(IL－10)elisa檢測試劑盒

有絲分裂細(xì)胞周期蛋白MPP9抗體       MPHOSPH9

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。
（9）細(xì)胞凍存。