
商品屬性:
產(chǎn)品名稱
英文名稱
Panc 05.04:Panc
0504
產(chǎn)品貨號(hào)
A01X917
培養(yǎng)條件
氣相:空氣,95%;CO2,5%,
生長特性
貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài)
上皮細(xì)胞樣
產(chǎn)品種屬
人
凍存條件
凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
組織來源
胰腺
用途
僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
商品詳情:
生長特性 貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
凍存條件
凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度:液氮
培養(yǎng)方案A(默認(rèn))
生長培養(yǎng)基:
RPMI-1640+15% FBS+10μg/mL Insulin+1% P/S
培養(yǎng)條件:
氣相:空氣,95%;CO2,5%, 溫度:37℃
推薦傳代比例 1:3-1:4
推薦換液頻率 2-3天/次
參考資料(來源文獻(xiàn))
背景描述 Panc 05.04 is a pancreatic
adenocarcinoma epithelial cell line derived, in 1995, from a primary tumor
removed from the head-of-the-pancreas of a female with pancreatic
adenocarcinoma. The cell line exhibits a K-ras oncogene mutation at codon 12
where a GGT --> GAT mutation resulted in substitution of aspartic acid for
glycine.
年齡(性別) 女性;77歲
組織來源 胰腺
細(xì)胞類型 腫瘤細(xì)胞
腫瘤類型 胰腺癌細(xì)胞
生物等級(jí) BSL-1
倍增時(shí)間 46.0 hours
致瘤性 Yes; Yes, forms tumors in nude
or SCID mice
抗原表達(dá)情況 MHC class I +; MHC class II
- Blood type B; Rh+
基因表達(dá)情況 cytokeratin 7; cytokeratin
18; K-ras+; MHC class I+; MHC class II-; blood type B; Rh+
保藏機(jī)構(gòu) ATCC; CRL-2557
細(xì)胞培養(yǎng)操作:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液(0.25%Trypsin)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1:3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3) 細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例;
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液,使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟:
(1)當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時(shí),進(jìn)行傳代。
(2)吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次,搖勻后棄掉。
(3)加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
(4)培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化,3min左右拿出,用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量,發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落,加入2倍量的胰蛋白酶中止消化,并吹打均勻,避免消化過度。
(5)細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi),1000rpm/min離心3~5min。
(6)吸棄上清,加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,吹打細(xì)胞使其均勻分散。
(7)吸棄細(xì)胞懸液,選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻,放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
(8)根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
(9)細(xì)胞凍存。
公司正在出售的產(chǎn)品:
Rabbit Anti-Guinea Pig IgM / PE 磷酸化上皮細(xì)胞癌轉(zhuǎn)化蛋白2抗體
過氧化物酶體**蛋白5相關(guān)蛋白抗體 PEX5L
鈉通道蛋白10α抗體 Anti-SCN10A/NAV1.8 PE標(biāo)記的兔抗豚鼠IgM
磷酸化轉(zhuǎn)錄中介因子Tif1β抗體 Anti-Phospho-TIF1 beta(Ser824) 血小板源性生長因子AA+BB抗體 Anti-PDGFAA + PDGFBB
鋅指蛋白239抗體 Anti-ZNF239 磷酸化1型神經(jīng)纖維瘤抗體 Anti-phospho-NF1(Ser2515)
同源盒蛋白HOX13抗體 HoxC13
前動(dòng)力蛋白2抗體 Anti-PROK2/Prokineticin 2 phospho-ECT2 (Thr373)
磷酸化細(xì)胞遷移誘導(dǎo)因子5抗體 Anti-phospho-RAC1(Ser71) 亞硫酸鹽氧化酶抗體 Anti-Sulfite oxidase/SUOX人鈣結(jié)合蛋白S100A13 elisa生化檢測試劑盒 HumanS100A13ELISAKit
突觸細(xì)胞粘附分子3抗體 Anti-Neuroligin 3 含纈酪肽蛋白抗體 Anti-VCP
大鼠3-羥基-3-甲基戊二酰輔酶A合酶(HMGCS)elisa生化檢測試劑盒 HMGCS ELISA Kit
人1,25OH2D3elisa檢測試劑盒 丙二醛(MDA)終點(diǎn)比色法定量檢測試劑盒
小鼠骨鈣素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)elisa生化檢測試劑盒 大鼠白介素23(IL-23)elisa檢測試劑盒
DNA結(jié)合蛋白Mel18抗體 Mel18
Panc 05.04人胰腺癌上皮細(xì)胞DNAJC13蛋白抗體 DNAJC13
選擇性胸腺細(xì)胞相關(guān)蛋白抗體 Anti-THEMIS 環(huán)指蛋白135抗體 Anti-RNF135