產(chǎn)品名稱：OP9小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞

商品屬性：

細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

商品詳情：

生長特性 貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

生長培養(yǎng)基 MEMα＋20% FBS＋1% P/S

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

推薦傳代比例 1:3-1:4

推薦換液頻率 2~3次/周

背景描述 OP9細(xì)胞源自新生的op/op小鼠顱蓋。因編碼M-CSF的基因中的一個(gè)突變，OP9細(xì)胞不能**有功能的巨噬細(xì)胞克隆刺激因子(M-CSF)。M-CSF的存在對胚胎干細(xì)胞(ES)分化成血細(xì)胞而不是其他巨噬細(xì)胞有抑制功能。OP9細(xì)胞可以用于與小鼠胚胎干細(xì)胞共培養(yǎng)以誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞分化成成紅血球來源的、骨髓來源的和B細(xì)胞譜系的血細(xì)胞。與OP9細(xì)胞共培養(yǎng)不需要外源的生長因子或復(fù)雜的胚胎結(jié)構(gòu)，這個(gè)系統(tǒng)對研究造血細(xì)胞的發(fā)育和分化的分子機(jī)理有用。

年齡（性別） 胚胎

組織來源 骨髓，基質(zhì)

細(xì)胞類型 基質(zhì)細(xì)胞系

生物等級 1

倍增時(shí)間 ~26小時(shí)

保藏機(jī)構(gòu) ATCC; CRL-2749

PRPF38A       細(xì)胞纖毛內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)同源蛋白80抗體

A型流感病毒蛋白PA-X抗體       Influenza A Protein PA-X

小鼠腎上腺髓質(zhì)素(ADM)elisa檢測試劑盒       mRNA前體剪接因子Prp38抗體

通用型肌酐（CREATININE）化學(xué)比色法定量檢測試劑盒       人P0蛋白抗體(IgM)elisa檢測試劑盒

泛素硫酯酶L3抗體  Anti-UCHL3       磷酸蛋白聚糖PTPRZ抗體  Anti-PTP zeta/Phosphacan

2號染色體開放閱讀框62抗體       C2orf62

大鼠β半乳糖苷酶(βGAL)elisa檢測試劑盒      IFT80

磷酸化蛋白激酶C抗體 PKC ε  Anti-phospho-PKC Epsilon（Ser729）       S100鈣結(jié)合蛋白P抗體  Anti-S100PFRMD6蛋白抗體       FRMD6

細(xì)胞中鏈羥脂酰脫氫酶（HYDROXYACYL COA DEHYDROGENASE）活性比色法定量檢測試劑盒       生物素檢測試劑盒

辣根過氧化物酶標(biāo)記的羊抗牛IgG H&L       Goat Anti-Bovine IgG H&L / HRP

犬B-細(xì)胞趨化因子1(BLC-1/CXCL13)elisa生化檢測試劑盒       BLC-1/CXCL13 ELISA Kit

小鼠過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)elisa生化檢測試劑盒       PPAR-αELISAKit

猴白介素2(IL-2)elisa生化檢測試劑盒       IL-2 ELISA Kit

OP9小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞人鵝膏蕈堿elisa生化檢測試劑盒       HumanAmanitinELISAKit

細(xì)胞膜/胞漿/核膜蛋白分步提取試劑盒50T       大鼠細(xì)胞功能關(guān)聯(lián)抗原1α(LFA1α)elisa檢測試劑盒

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
（9）細(xì)胞凍存。