產(chǎn)品名稱：NOZ人膽囊癌細(xì)胞

商品屬性：

細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

商品詳情：

生長特性 貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

生長培養(yǎng)基 Williams'E＋10% FBS＋1% P/S

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

推薦換液頻率 2~3次/周

年齡（性別） 女；48歲

組織來源 膽囊

細(xì)胞類型 腫瘤細(xì)胞

腫瘤類型 肝膽癌細(xì)胞

生物等級(jí) 1

倍增時(shí)間 ~48 hours

保藏機(jī)構(gòu) JCRB; JCRB1033

S100Z       緊密連接蛋白20抗體

KIAA2026蛋白抗體       KIAA2026

人FMS樣酪氨酸激酶3（FLT3）elisa檢測(cè)試劑盒       S100鈣結(jié)合蛋白ζ抗體

小鼠多巴胺(DA)elisa檢測(cè)試劑盒       大鼠SHC轉(zhuǎn)化蛋白1(SHC1)elisa檢測(cè)試劑盒

癲癇樣相關(guān)蛋白6抗體  Anti-SEZ6L       細(xì)胞中心粒蛋白抗體  Anti-POC5

β1，3半乳糖轉(zhuǎn)移酶3抗體       B3GALNT1

亞甲基藍(lán)（METHYLENE BLUE）復(fù)染試劑盒      Claudin 20

T細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白TDAG51抗體  Anti-PHLDA1/TDAG51       軟骨基質(zhì)相關(guān)蛋白UCMA抗體  Anti-UCMA鋅指蛋白433抗體       ZNF433

小鼠神經(jīng)激肽B(NKB)elisa檢測(cè)試劑盒       大鼠肌鈣蛋白I(TNI)elisa檢測(cè)試劑盒

兔抗人IgM       Rabbit Anti-Human IgM

馬促腎上腺皮質(zhì)(ACTH)elisa生化檢測(cè)試劑盒       ACTH ELISA kit

小鼠丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶/谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT/GPT)elisa生化檢測(cè)試劑盒       ALT/GPTELISAKit

魚胰島素樣生長因子1受體(IGF-1R)elisa生化檢測(cè)試劑盒       IGF-1R ELISA Kit

NOZ人膽囊癌細(xì)胞人穿孔素/成孔蛋白(PRF1/PFP)elisa生化檢測(cè)試劑盒       HumanPRF1/PFPELISAKit

人MAX二聚化蛋白1(MXD1)elisa檢測(cè)試劑盒       組織PKCδ激酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
（9）細(xì)胞凍存。