細(xì)胞培養(yǎng)操作：
1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。
2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無(wú)菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無(wú)血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
商品屬性：
產(chǎn)品名稱
英文名稱
NCI-H2405
產(chǎn)品貨號(hào)
AXB6531
培養(yǎng)條件
RPMI1640 +5% fetal
bovine serum37 ℃, 5% CO2
生長(zhǎng)特性
貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞形態(tài)
上皮細(xì)胞樣
產(chǎn)品種屬
人
凍存條件
90% FBS + 10% DMSO
組織來(lái)源
肺
用途
僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
種屬來(lái)源；人
組織來(lái)源；肺
性別年齡；47歲，白人男性
生長(zhǎng)特性；貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞形態(tài)；上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞規(guī)格；1 X 106cells/T25或1 mL凍存管
培養(yǎng)條件；RPMI1640 +5% fetal bovine
serum37 ℃, 5% CO2
凍存條件；90% FBS + 10% DMSO
傳代方法；1:3傳代, 2-3天傳1代
公司正在出售的產(chǎn)品：
NARG1L FLJ45825蛋白抗體
植物維生素D(VD)elisa生化檢測(cè)試劑盒 VD ELISA Kit
動(dòng)物糖解法O-糖基分解試劑盒 NMDA受體調(diào)節(jié)1樣蛋白抗體
大鼠細(xì)胞色素C(Cyt-C)elisa檢測(cè)試劑盒 載玻片細(xì)胞CDK4蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒
BTRC2蛋白抗體 Anti-BTRC2/beta TRCP2 磷酸化P73腫瘤抑制基因抗體 Anti-Phospho-p73(Tyr99)
人催產(chǎn)素(OT)elisa生化檢測(cè)試劑盒 OTELISAKit
小鼠Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)elisa檢測(cè)試劑盒 FLJ45825
嗅球蛋白1抗體 Anti-OLFM1/Noelin 突觸結(jié)合蛋白相關(guān)基因2抗體 Anti-synaptotagmin-2脂肪酸結(jié)合蛋白9抗體 FABP9
尿蛋白定量測(cè)試盒 100管/96樣 CBB法 血液甘肽S轉(zhuǎn)移酶（GSH ST）總活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
APC標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈 Rabbit Anti-Mouse Kappa light chain / APC
人Rho家族GTP酶1(RND1)elisa生化檢測(cè)試劑盒 RND1ELISAKit
小鼠胎盤(pán)泌乳素(PL)elisa生化檢測(cè)試劑盒 PLELISAKit
大鼠雌酮(E1)elisa生化檢測(cè)試劑盒 E1 ELISA kit
NCI-H2405人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)elisa生化檢測(cè)試劑盒 HumanbFGFELISAKit
大鼠促甲狀腺（TSH）elisa檢測(cè)試劑盒 小鼠降鈣素原(PCT)elisa檢測(cè)試劑盒
細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無(wú)超過(guò)80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過(guò)度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
（9）細(xì)胞凍存。