
本網(wǎng)站銷售的所有產(chǎn)品均不得用于人類或動物之臨床診斷,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
商品屬性:
產(chǎn)品貨號 |
A01X1178 |
凍存條件 |
無血清凍存液,液氮儲存 |
產(chǎn)品分類 |
牛細胞系 |
產(chǎn)品種屬 |
牛 |
生長特性 |
貼壁生長 |
細胞形態(tài) |
上皮細胞樣 |
英文名稱 |
MDBK:MDBK |
組織來源 |
腎;正常細胞 |
商品介紹:
細胞別稱:MDBK (NBL-1); NBL-1;
Madin-Darby Bovine Kidney; Madin Darby Bovine Kidney
種屬來源:牛
年齡性別:雄;成年
組織來源:腎;正常細胞
生長特性:貼壁生長
細胞形態(tài):上皮細胞樣
背景簡介:MDBK(NBL-1)細胞是由S·H·Madin和N·B·Darby在1957年2月18日從一只表觀正常的成年牛腎臟建立的。1973年,這株MDBK(NBL-1)細胞被牛病毒性痢毒(BVDV)感染;1982年,發(fā)現(xiàn)了一株未被BVDV感染的MDBK(NBL-1)細胞株,此細胞初來自ATCC1967年7月第96代的凍存管。MDBK(NBL-1)細胞的后代經(jīng)NVSL檢測,未發(fā)現(xiàn)被任何病毒污染的證據(jù)。1982年8月,R·A·Van Deusen將MDBK(NBL-1)提供給ATCC時,已傳代至第110代;MDBK(NBL-1)細胞未被BVDV感染。
生物等級:2
細胞規(guī)格:1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝
支原體檢測:無
基因表達情況:keratin
保藏機構:ATCC; CCL-22 ATCC;
CRL-6071DSMZ; ACC-174 ECACC; 90050801
培養(yǎng)基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
培養(yǎng)條件:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
凍存條件:無血清凍存液,液氮儲存
培養(yǎng)注意事項 :
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細胞因子等,確保細胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題,責任由 客戶自行承擔。
3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分細胞由于溫度 變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常現(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后,75%酒精瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。
4. 貼壁細胞可以消化,懸浮細胞直接混勻收集細胞,900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細胞,再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,,用新鮮的完全培養(yǎng)基重懸 細胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和我司技術部溝通 交流。由于運輸?shù)脑?,個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細胞 的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細胞僅供科研使用。
8. 備注:運輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培 養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。 收到細胞后次傳代建議 1:2 傳代 。
9. 注意: 1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。
細胞系實驗步驟:
?一、細胞培養(yǎng)準備?:
?生物柜的使用?:確保所有接觸細胞的物品都在生物柜中通過紫外,防止污染?。
?培養(yǎng)皿和培養(yǎng)瓶?:提供細胞生長的環(huán)境,保持恒定的溫度(通常為37℃)?。
?培養(yǎng)基和血清?:特制的培養(yǎng)基包含各種營養(yǎng)物質,如糖、氨基酸和維生素,添加胎牛血清和雙抗以提供生長因子和防止污染?。
?二、細胞培養(yǎng)過程?:
?細胞接收與記錄?:記錄細胞系的相關信息,包括背景信息、傳代培養(yǎng)、冷凍保存等?。
?細胞形態(tài)觀察?:定期檢查細胞的形態(tài)和行為,確保細胞狀態(tài)健康,無污染?。
?細胞傳代?:當細胞密度超過80%時進行傳代,注意消化時間和條件,避免細胞損傷?。
三、?細胞系鑒定與維護?:
?細胞系鑒定?:通過STR圖譜確定細胞的遺傳特征,防止細胞系被誤認或交叉污染?。
?細胞保存與管理?:定期進行細胞冷凍保存,確保細胞的長期存活和可用性?。
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