
細(xì)胞培養(yǎng)操作:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液(0.25%Trypsin)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1:3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3) 細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例;
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液,使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱
英文名稱
LS1034:LS1034
產(chǎn)品貨號
A01X826
培養(yǎng)條件
生長特性
貼壁生長
細(xì)胞形態(tài)
上皮細(xì)胞樣
產(chǎn)品種屬
人
凍存條件
詳見說明
組織來源
盲腸 大腸癌
用途
僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
細(xì)胞介紹
LS1034 是一種結(jié)直腸癌細(xì)胞系,于 1989 年從一名 54 歲的高加索男性患者的原發(fā)性腫瘤活檢中分離出來,該患者被診斷為 Dukes C 型中度至低分化盲腸癌。
細(xì)胞特性
1)來源:盲腸 大腸癌
2)形態(tài):上皮樣,貼壁生長
3)含量:>1×10? 細(xì)胞數(shù)
4)規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
5)用途:僅供科研使用。

公司正在出售的產(chǎn)品:

細(xì)胞外基質(zhì)磷酸化抗體 MEPE ?;o酶A結(jié)合結(jié)構(gòu)域蛋白4抗體 ACBD4
組織表達(dá)受體蛋白樣蛋白2抗體 RELL2 磷酸化mTOR相關(guān)調(diào)控蛋白抗體 Phospho-Raptor (Ser792)
癌癥/睪丸抗原1 抗體 CTAG1B 白細(xì)胞介素1受體相關(guān)蛋白單克隆抗體 Interleukin-1 receptor-like 1/ST2
谷氨酰胺轉(zhuǎn)胺酶2抗體 Transglutaminase 2 過氧化還原酶1重組兔單克隆抗體 Peroxiredoxin 1
溶質(zhì)載體家族10成員5抗體 SLC10A5 乳腺癌細(xì)胞分化因子P45抗體 HRG beta 1
ATP依賴的干擾素反應(yīng)蛋白1抗體 TOR3A/ADIR2 BTRC2蛋白抗體 BTRC2
致盲基因LCA5樣蛋白抗體 LCA5L 腫瘤相關(guān)鈣信號傳感器2抗體 TROP2
KLF樣轉(zhuǎn)錄因子7抗體 KLF7 MPP4蛋白抗體 MPP4雞睪酮(T)elisa分析檢測試劑盒 細(xì)胞N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)活性比色法定量檢測試劑盒
多發(fā)性骨髓瘤基因抗體 MYEOV 泛甲基賴氨酸抗體 pan methyl Lysine
大鼠ERp57 elisa分析檢測試劑盒 小鼠肝再生擴(kuò)展生長因子(GFER)elisa檢測試劑盒
小鼠脂氧素A4(LXA4)elisa檢測試劑盒 大鼠黏著斑蛋白(VCL)elisa檢測試劑盒
簡單結(jié)晶紫染色試劑盒 兔Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)elisa檢測試劑盒
人S100鈣結(jié)合蛋白A9/鈣粒蛋白B(S100A9)elisa分析檢測試劑盒 無脊椎動物和昆蟲體液基質(zhì)金屬(MMP)總活性比色法定量檢測試劑盒
LS1034人結(jié)腸腺癌細(xì)胞小鼠腺來源的血管內(nèi)皮生長因子(EG-VEGF)elisa檢測試劑盒 大鼠睪酮(T)elisa檢測試劑盒
胰島素生長因子樣家族成員4抗體 IGFL4 乙酰轉(zhuǎn)移酶9抗體 NAT9
細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟:
(1)當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時,進(jìn)行傳代。
(2)吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次,搖勻后棄掉。
(3)加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
(4)培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化,3min左右拿出,用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量,發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落,加入2倍量的胰蛋白酶中止消化,并吹打均勻,避免消化過度。
(5)細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi),1000rpm/min離心3~5min。
(6)吸棄上清,加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,吹打細(xì)胞使其均勻分散。
(7)吸棄細(xì)胞懸液,選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻,放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
(8)根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。
(9)細(xì)胞凍存。