產(chǎn)品名稱：LOVO/5FU人結(jié)直腸癌細(xì)胞氟尿嘧啶耐藥株

細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

商品屬性：

產(chǎn)品名稱	LOVO/5FU人結(jié)直腸癌細(xì)胞氟尿嘧啶耐藥株	英文名稱	LOVO/5FU:LOVO5FU
產(chǎn)品貨號	A01X824	培養(yǎng)條件
生長特性	貼壁生長	細(xì)胞形態(tài)	上皮細(xì)胞樣
產(chǎn)品種屬	人	凍存條件	詳見說明
組織來源	人結(jié)直腸癌細(xì)胞耐藥篩選	用途	僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

細(xì)胞介紹

LOVO/5-FU為由LOVO細(xì)胞構(gòu)建的耐5-FU細(xì)胞株。

細(xì)胞特性

1）來源：人結(jié)直腸癌細(xì)胞耐藥篩選

2）形態(tài)：上皮細(xì)胞樣，貼壁生長

3）含量：>1×106細(xì)胞數(shù)

4）規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

5）用途：僅供科研使用。

PCQAP蛋白抗體 PCQAP       PerCP-Cy5.5標(biāo)記人CD64單克隆抗體 human CD64/PerCP-Cy5.5

組蛋白H3 K9甲基轉(zhuǎn)移酶重組兔單克隆抗體 SUV39H1       11號染色體開放閱讀框67抗體 C11ORF67

視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤結(jié)合蛋白P48抗體 RBBP4       絲氨酸/精氨酸相關(guān)核基質(zhì)蛋白4抗體 SRRM4

鋅指蛋白776抗體 ZNF776       信號通路Wnt4單克隆抗體 WNT4

EHD3蛋白抗體 EHD3       FAM119A蛋白抗體 FAM119A

黑皮質(zhì)素-1受體抗體 MC1R       環(huán)指蛋白146抗體 RNF146

程序性死亡配體2（CD273）抗體 PDCD1LG2      單加氧酶X抗體 MOXD1

磷酸化受體酪氨酸激酶抗體 phospho-TYRO3 (Tyr681)       磷酸乙醇胺轉(zhuǎn)移酶2抗體 PCYT2半纖維素含量測試盒       高純胞漿S100蛋白制備試劑盒

人成纖維細(xì)胞生長因子23(FGF-23)elisa分析檢測試劑盒       FGF-23ELISAKit

彩虹預(yù)染蛋白Marker10-250KD 250ul       細(xì)胞樣品氧化酶表達(dá)熒光定量檢測試劑盒

組織甘肽（GLUTATHIONE）總濃度比色法定量檢測試劑盒       人百日咳病毒抗體(IgA)elisa分析檢測試劑盒

大鼠成纖維細(xì)胞生長因子3(FGF3)elisa檢測試劑盒       小鼠乙酰膽堿酯酶（AchE）elisa檢測試劑盒

小鼠膽堿磷酸甘油酯(PC/CPG)elisa檢測試劑盒       大鼠Ⅵ型膠原(Col Ⅵ)elisa分析檢測試劑盒

LOVO/5FU人結(jié)直腸癌細(xì)胞氟尿嘧啶耐藥株活體細(xì)胞脘蛋白去糖基化試劑盒       人11-脫氧皮質(zhì)醇elisa檢測試劑盒免費(fèi)代測

魚脫氫表雄酮(DHEA)elisa分析檢測試劑盒       DHEA ELISA Kit

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
（9）細(xì)胞凍存。