產(chǎn)品名稱：LNCaP clone FGC人前列腺癌細(xì)胞

細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說(shuō)明書為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無(wú)菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無(wú)血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

商品屬性：

產(chǎn)品名稱	LNCaP clone FGC人前列腺癌細(xì)胞	英文名稱	LNCaP clone FGC:LNCaP clone FGC
產(chǎn)品貨號(hào)	A01X822	培養(yǎng)條件	氣相：空氣，95%；CO2，5%
生長(zhǎng)特性	貼壁細(xì)胞	細(xì)胞形態(tài)	上皮細(xì)胞樣
產(chǎn)品種屬	人	凍存條件	凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
組織來(lái)源	前列腺；左鎖骨結(jié)癌轉(zhuǎn)移灶	用途	僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

生長(zhǎng)特性 貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

生長(zhǎng)培養(yǎng)基 RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

推薦傳代比例 1:3-1:4

推薦換液頻率 2~3次/周

注意事項(xiàng) 1）該細(xì)胞并不形成一致的單層，而是形成集落。（2）該細(xì)胞會(huì)使培養(yǎng)基快速變酸，且生長(zhǎng)緩慢，故傳代后 48 小時(shí)內(nèi)不應(yīng)擾動(dòng)；（3）普通TC處理的培養(yǎng)瓶或皿不能使細(xì)胞很好的貼壁，培養(yǎng)難度較高，需使用 Corning 的 cellbind 細(xì)胞培養(yǎng)瓶 ，或者使用多聚-L-賴氨酸溶液包被過(guò)的培養(yǎng)皿； （4）在細(xì)胞運(yùn)輸途中，多數(shù)細(xì)胞會(huì)從培養(yǎng)瓶底分離，大片懸浮在培養(yǎng)基中，按照收貨注意事項(xiàng)處理即可恢復(fù)正常。

背景描述 人前列腺癌細(xì)胞LNCaP clone FGC是從一位50歲白人男性(血型B+)的左鎖骨結(jié)針刺活檢中分離，該患者經(jīng)確診為前列腺癌轉(zhuǎn)移。LNCaP clone FGC細(xì)胞對(duì)5-α-二氫睪酮(生長(zhǎng)調(diào)節(jié)子和酸性磷酸脂酶產(chǎn)物)有響應(yīng)。LNCaP clone FGC細(xì)胞并不形成一致的單層，而是形成集落，在傳代時(shí)可以用滴管反復(fù)吹吸打碎。LNCaP clone FGC細(xì)胞僅僅輕輕地吸附在基底上，不形成匯合，很快使培養(yǎng)基變酸。LNCaP clone FGC細(xì)胞生長(zhǎng)極其緩慢，傳代后48小時(shí)內(nèi)不應(yīng)擾動(dòng)。當(dāng)培養(yǎng)瓶封包后，多數(shù)LNCaP clone FGC細(xì)胞從培養(yǎng)瓶底分離，懸浮在培養(yǎng)基中。收到后，在通常培養(yǎng)單層細(xì)胞的條件下培養(yǎng)24-48小時(shí)，以使細(xì)胞再貼壁。此后，可以換上新鮮培養(yǎng)液。如果需要，培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)容物可以收集，300g離心15分鐘，以10毫升培養(yǎng)液重懸并培養(yǎng)到一個(gè)單獨(dú)的培養(yǎng)瓶中。

年齡（性別） 男；50歲

組織來(lái)源 前列腺；左鎖骨結(jié)癌轉(zhuǎn)移灶

細(xì)胞類型 腫瘤細(xì)胞

腫瘤類型 前列腺癌細(xì)胞

生物等級(jí) 1

倍增時(shí)間 ~32-36 hours

致瘤性 Yes, in soft agar.Yes, the cells are tumorigenic in nude mice.

受體表達(dá)情況 androgen receptor, positive;estrogen receptor, positive

基因表達(dá)情況 human prostatic acid phosphatase; prostate specific antigen

保藏機(jī)構(gòu) ATCC; CRL-1740 BCRC; 60088 BCRJ; 0149 ECACC; 89110211

G蛋白偶聯(lián)受體120抗體 GPR120       G蛋白信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子19抗體 RGS19

抑制蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體 ARRDC3       原鈣粘附蛋白9抗體 PCDH9

嘌呤ATP受體抗體 P2Y2       鞘脂激活蛋白原抗體 PSAP

未分化胚胎干細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子1抗體 UTF1       細(xì)胞骨架蛋白C端PDLIM1抗體 PDLIM1

AF680標(biāo)記的乳鐵蛋白抗體 Lactoferrin, Alexa Flour 680 conjugated       AF750標(biāo)記的血型糖蛋白A（CD235a）抗體 Glycophorin A, Alexa Fluor 750 conjugated

泛酸激酶2抗體 PANK2       呋喃西林小鼠單抗 SEM

SQSTM1/P62單克隆抗體 SQSTM1/P62      TRIM35蛋白抗體 TRIM35

緊密連接蛋白20抗體 Claudin 20       卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白74B抗體 CCDC74B大鼠骨成型蛋白4(BMP-4)elisa分析檢測(cè)試劑盒       魚胰島素樣生長(zhǎng)因子II(IGF2)elisa分析檢測(cè)試劑盒

醛固酮類還原酶家族7成員A2抗體       AKR7A2

BJ5183       人鈣調(diào)素特異抗體(CAM-ab)elisa檢測(cè)試劑盒

小鼠T細(xì)胞表面糖蛋白CD3 epsilon鏈(CD3E/T3E)elisa檢測(cè)試劑盒       磷酸酶抑制劑混合物1ml

載玻片細(xì)胞EGFR 蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒       綿羊白蛋白(Albumin)elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)

大鼠細(xì)胞色素C氧化酶(COX)elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)       石蠟切片組織衰老特異性早期脂褐素油性紅原位間接染色試劑盒

LNCaP clone FGC人前列腺癌細(xì)胞兔睪酮（Testoterone）elisa檢測(cè)試劑盒       乳品抗壞血酸比色法定量檢測(cè)試劑盒

組織相容性抗原DQB2抗體       HLA-DQB2

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無(wú)超過(guò)80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過(guò)度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
（9）細(xì)胞凍存。