
細胞培養(yǎng)操作:
1) 復蘇細胞:以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
b、加1ml消化液(0.25%Trypsin)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細胞懸液按1:3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3) 細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例;
a、收集細胞及細胞培養(yǎng)液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進行細胞計數(shù)。
b、根據(jù)細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液,使細胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細胞懸液,注意凍存管做好標識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱
英文名稱
HPT-8
產(chǎn)品貨號
AXB9718
培養(yǎng)條件
氣相:95%空氣+5%二氧化碳;
生長特性
貼壁生長
細胞形態(tài)
上皮細胞樣
產(chǎn)品種屬
人
凍存條件
無血清凍存液,液氮儲存
組織來源
表皮
用途
僅供科研研究實驗
商品詳情:
細胞別稱;HPT-8;人飼養(yǎng)層上皮細胞
種屬來源;人
組織來源;表皮
生長特性;貼壁生長
細胞形態(tài);上皮細胞樣
細胞代數(shù);10代以內(nèi)
細胞規(guī)格;1x106cells/T25或1mL凍存管
支原體檢測;無
培養(yǎng)基;RPMI-1640+10%FBS+1%雙抗
培養(yǎng)條件;氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
凍存條件;無血清凍存液,液氮儲存

公司正在出售的產(chǎn)品:

γ干擾素誘導蛋白202抗體 IFI202 白介素17受體抗體 IL17RA
BRD3蛋白抗體 BRD3 CD39重組兔單克隆抗體 CD39/ENTPD1
纖維母細胞生長因子4抗體 FGF4 線粒體蘋果酸脫氫酶2抗體 MDH2
腫瘤壞死因子受體相互作用蛋白抗體 TRIP 軸突蛋白3 beta抗體 Neurexin-3-beta
L型氨基酸轉(zhuǎn)運蛋白2抗體 LAT2 MS4A4E蛋白抗體 MS4A4E
離子型谷氨酸受體4抗體 GLUR4 磷酸化CREB轉(zhuǎn)錄共激 Phospho-CRTC1 (Ser151)
睪丸特異絲氨酸/蘇氨酸激酶6抗體 TSSK6 骨形態(tài)發(fā)生蛋白4抗體 BMP4
人瘤病毒18型E4抗體 HPV18 E4 軟骨相關(guān)蛋白CRTAP抗體 CRTAP糞便副傷A(Salmonella Paratyphi A)定性基因檢測試劑盒 小鼠γ分泌酶elisa分析檢測試劑盒
配體依賴核受體共抑制因子樣蛋白抗體 LCORL 橋粒糖蛋白1/2抗體 Desmocollin 1 + 2
冰凍切片組織DAP KINASE蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒 大鼠整合素αM型((ITG αM/CD11b)elisa檢測試劑盒
人EB病毒衣殼抗原(EBVCA)抗體(IgM)elisa檢測試劑盒 細胞CASEIN KINASE 1激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
小鼠醛固酮(ALD)elisa分析檢測試劑盒 大鼠含球蛋白樣環(huán)和上皮生長因子樣域酪氨酸激酶2(Tie-2)elisa分析檢測試劑盒
?;D(zhuǎn)移酶(AAT)測試盒 小鼠過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)elisa檢測試劑盒免費代測
HPT-8(滋養(yǎng)層上皮細胞)昆蟲膜蛋白提取試劑盒50T 冰凍切片結(jié)締組織(CONNECTIVE TISSUE)格莫瑞(Gomori)染色試劑盒
HEAT重復內(nèi)含蛋白5A蛋白抗體 HEATR5A IQSEC2抗體 IQSEC2
細胞傳代培養(yǎng)操作步驟:
(1)當顯微鏡下細胞形態(tài)和生長密度達到90%時,進行傳代。
(2)吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次,搖勻后棄掉。
(3)加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
(4)培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進行消化,3min左右拿出,用顯微鏡觀察細胞有無超過80%的量,發(fā)生收縮變圓、細胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞 脫落,加入2倍量的胰蛋白酶中止消化,并吹打均勻,避免消化過度。
(5)細胞懸液吸至離心管內(nèi),1000rpm/min離心3~5min。
(6)吸棄上清,加入培養(yǎng)液重懸細胞,吹打細胞使其均勻分散。
(7)吸棄細胞懸液,選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中,補充培養(yǎng)液并搖勻,放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進行培養(yǎng)。
(8)根據(jù)細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。
(9)細胞凍存。