
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,超低比價,產(chǎn)品名稱貨期短,價格優(yōu),售后齊全。本公司僅用于科研實驗。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號 |
matrix基質膠(相關2) |
5ml |
FS-X019938 |
產(chǎn)品名稱:matrix基質膠(相關2)
產(chǎn)品規(guī)格:5ml
貨號:BH-X019938
保存溫度(℃):/-20℃
運輸溫度(℃):/-20℃(干冰)
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
主要功能:
(1)血管平滑肌細胞的再生能力是原發(fā)血管病變的重要因素。
(2)表達鈣通道及ICAM-1和VCAM-1,參與血管壁的炎癥反應。
(3)與血管的進展和穩(wěn)定有關。
生理變化:
(1)主動脈硬化。
(2)主動脈瘤
(3)主動脈鈣化。
基本特性:
(1)組織來源于正常大鼠大動脈組織。
(2)鑒定:肌動蛋白,alpha-SMA和Desmin熒光染色。
(3)原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
(4)每凍存管細胞數(shù):>5×105 cells/1ml。
(5)肌動蛋白,alpha-SMA和Desmin熒光染色驗證。
(6)不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原體、酵母。
培養(yǎng)步驟:
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
青霉素-鏈霉素
Penicillin -Steptomycin 每毫升合劑含10000U青霉素和10000U鏈霉素,保存:-5 - -20°15140-148
ESBL顯色培養(yǎng)基 用于產(chǎn)超廣譜β內酰胺酶(ESBL)的耐藥株的分離和鑒定,同時抑制帶有ampC抗性細的生長1000ml
沙保氏葡萄糖瓊脂 (CM0041) Oxoid
疊氮鈉血瓊脂基礎 (CM0259) Oxoid
產(chǎn)氣莢膜瓊脂基礎 (OPSP) (CM0543) Oxoid
麥康凱瓊脂3號 2
matrix基質膠(相關2)髓觸發(fā)受體1(TREM1)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法) ELISAKitforTriggeringReceptorExpressedOnMyeloidCells1(TREM1) 規(guī)格:48T/96T 進口、國產(chǎn)
別孕烯醇酮(AP)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法) ELISAKitforAllopregnanolone(AP) 規(guī)格:48T/96T 進口、國產(chǎn)
脊椎蛋白1(SPON1)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法) ELISAKitforSpondin1(SPON1) 規(guī)格:48T/96T 進口、國產(chǎn)
防御素β113(DEFβ113)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法) ELISAKitforDefensinBeta113(DEFb113) 規(guī)格:48T/96T 進口、國產(chǎn)
角蛋白20(KRT20)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法) ELISAKitforKeratin20(KRT20) 規(guī)格:48T/96T 進口、國產(chǎn)
天冬酰胺酶(ASPG)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法) ELISAKitforAsparaginase(ASPG) 規(guī)格:48T/96T 進口、國產(chǎn)
基質金屬蛋白酶3(MMP3)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法) ELISAKitforMatrixMetalloproteinase3(MMP3) 規(guī)格:48T/96T 進口、國產(chǎn)
橋粒芯膠粘蛋白1(DSC1)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法) ELISAKitforDesmocollin1(DSC1) 規(guī)格:48T/96T 進口、國產(chǎn)
表皮調節(jié)素(EREG)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法) ELISAKitforEpiregulin(EREG) 規(guī)格:48T/96T 進口、國產(chǎn)
泛醌蛋白1(UBQLN1)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法) ELISAKitforUbiquilin1(UBQLN1) 規(guī)格:48T/96T 進口、國產(chǎn)
操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內完全解凍,使細胞能盡快通過*易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養(yǎng)。
6)觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。