
公司細胞廣泛用于國內院校的細胞生物學研究,作為實驗項目研究。
產品名稱 |
腹腔主動脈內皮細胞 |
規(guī)格 |
5×105 |
貨號 |
FS-X019779 |
產品名稱:腹腔主動脈內皮細胞
產品規(guī)格:5×105
貨號:BH-X019779
產品類型:原代細胞
單位:T25/瓶
提供細胞鑒定:提供**熒光鑒定報告
保存培養(yǎng)溫度(℃):37
運輸溫度(℃):常溫
培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及細胞化學檢測。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為玻璃**,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
細胞培養(yǎng)方法:
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入完全培養(yǎng)基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入完全培養(yǎng)基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
細胞處理方法:
以下細胞處理方法及細胞說明書僅供參考,具體操作還需要根據到貨時細胞密度,細胞生長狀態(tài)等具體情況,酌情處理,如需要更詳細技術指導,請及時電話或郵件聯(lián)系。
一.貼壁細胞
客戶接收到細胞,用75%的酒精(建議配制75%酒精的水是過的)培養(yǎng)瓶外部。
肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。
顯微鏡觀察細胞,當細胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細胞應該在37度培養(yǎng)箱預溫1-2h后再做處理。如未達到細胞傳代密度,培養(yǎng)瓶應預留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
將細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管完全吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細胞,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
1000rpm,5min離心,重懸細胞。換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2 培養(yǎng)。
二.懸浮細胞
1. 接收到細胞,用75%的酒精(建議配制75%酒精的水是過的)培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。
3. 嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管完全吸出(嚴禁直接傾倒)。
5. 1000rpm,5min離心,重懸細胞。 換新的細胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基,37℃,5%CO2 培養(yǎng)。
過敏C5a(補體C5a)抗體 Anti-C5a0.1ml
卵巢癌抗原抗體 Anti-CA1250.1ml
Caspase 激活的脫氧核糖核酸酶抗體 Anti-CAD/CPAN0.1ml
鈣介質素抗體 Anti-caldesmon0.1ml
鈣激活的中性蛋白酶2抗體 Anti-Calpain 20.1ml
磷酸化鈣/鈣調素依賴蛋白激酶2α抗體 Anti-phospho-CaMK2a0.1ml
鈣/鈣調蛋白依賴蛋白激酶IG抗體 Anti-Camk1g0.1ml
腹腔主動脈內皮細胞甲基化CpG結合蛋白2(MECP2)elisa檢測試劑盒英文名稱:MECP2 ELISA Kit,英文縮寫:MECP2,產品別名:甲基化CpG結合蛋白2(MECP2)ELISA檢測試劑盒,甲基化CpG結合蛋白2(MECP2)檢測試劑盒產品保存:2~8℃、有效期6個月。
黃嘌呤氧化酶(XOD)elisa檢測試劑盒英文名稱:XOD ELISA Kit,英文縮寫:XOD,產品別名:黃嘌呤氧化酶(XOD)ELISA檢測試劑盒,黃嘌呤氧化酶(XOD)檢測試劑盒產品保存:2~8℃、有效期6個月。
基質金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/Gelatinase A)elisa檢測試劑盒英文名稱:MMP-2/Gelatinase A ELISA Kit,英文縮寫:MMP-2/Gelatinase A,產品別名:基質金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/Gelatinase A)ELISA檢測試劑盒,基質金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/Gelatinase A)檢測試劑盒產品保存:2~8℃、有效期6個月。
和肽素(copeptin)elisa檢測試劑盒英文名稱:copeptin ELISA Kit,英文縮寫:copeptin,產品別名:和肽素(copeptin)ELISA檢測試劑盒,和肽素(copeptin)檢測試劑盒產品保存:2~8℃、有效期6個月。
骨膜蛋白/成骨特異性因子2(POSTN)elisa檢測試劑盒英文名稱:POSTN ELISA Kit,英文縮寫:POSTN,產品別名:骨膜蛋白/成骨特異性因子2(POSTN)ELISA檢測試劑盒,骨膜蛋白/成骨特異性因子2(POSTN)檢測試劑盒產品保存:2~8℃、有效期6個月。
高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)elisa檢測試劑盒英文名稱:HDL-C ELISA Kit,英文縮寫:HDL-C,產品別名:高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)ELISA檢測試劑盒,高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)檢測試劑盒產品保存:2~8℃、有效期6個月。
甘露聚糖結合凝集素相關絲氨酸蛋白酶(MASP)elisa檢測試劑盒英文名稱:MASP ELISA Kit,英文縮寫:MASP,產品別名:甘露聚糖結合凝集素相關絲氨酸蛋白酶(MASP)ELISA檢測試劑盒,甘露聚糖結合凝集素相關絲氨酸蛋白酶(MASP)檢測試劑盒產品保存:2~8℃、有效期6個月。
肺炎衣原體抗體IgM(Cpn-IgM)elisa檢測試劑盒英文名稱:Cpn-IgM ELISA Kit,英文縮寫:Cpn-IgM,產品別名:肺炎衣原體抗體IgM(Cpn-IgM)ELISA檢測試劑盒,肺炎衣原體抗體IgM(Cpn-IgM)檢測試劑盒產品保存:2~8℃、有效期6個月。
多萜長醇二磷酸寡糖蛋白環(huán)糊精糖基轉移酶(DDOST/OST-48)elisa檢測試劑盒英文名稱:DDOST/OST-48 ELISA Kit,英文縮寫:DDOST/OST-48,產品別名:多萜長醇二磷酸寡糖蛋白環(huán)糊精糖基轉移酶(DDOST/OST-48)ELISA檢測試劑盒,多萜長醇二磷酸寡糖蛋白環(huán)糊精糖基轉移酶(DDOST/OST-48)檢測試劑盒產品保存:2~8℃、有效期6個月。
第10號染色體缺失并與張力蛋白同源的磷酸酶(PTEN/MMAC1)elisa檢測試劑盒英文名稱:PTEN/MMAC1 ELISA Kit,英文縮寫:PTEN/MMAC1,產品別名:第10號染色體缺失并與張力蛋白同源的磷酸酶(PTEN/MMAC1)ELISA檢測試劑盒,第10號染色體缺失并與張力蛋白同源的磷酸酶(PTEN/MMAC1)檢測試劑盒產品保存:2~8℃、有效期6個月。
蛋白S(Protein S)elisa檢測試劑盒英文名稱:Protein S ELISA Kit,英文縮寫:Protein S,產品別名:蛋白S(Protein S)ELISA檢測試劑盒,蛋白S(Protein S)檢測試劑盒產品保存:2~8℃、有效期6個月。