產(chǎn)品名稱：MAPK絲裂原激活的蛋白激酶/MAP激酶檢測試劑盒

操作流程：

（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。 

（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。

（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。

（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 

（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 

（6）洗板，同（4）。 

（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 

（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 

（9）洗板，同（4）。 

（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 

（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 

（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。

（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。

服務(wù)：所有的檢測試劑盒均免費(fèi)代測，您只需要將您準(zhǔn)備好的樣本郵寄到我司即可！本地也可以上門收取樣本！全程檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)，免費(fèi)代做實(shí)驗(yàn)。本公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)。老客戶可享受優(yōu)惠折扣服務(wù)！

產(chǎn)品名稱：MAPK絲裂原激活的蛋白激酶/MAP激酶檢測試劑盒
英文名稱：mitogen activited protein kinase,MAPK ELISA Kit

貨號：A112690

規(guī)格：96T/48T 

保存；2-8℃。

檢測目的：用于檢測血漿，血清及相關(guān)液體等樣本。例如灌洗液、腦脊液、血清、血漿、尿液、胸腹水、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本.

檢測種屬：大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、等動植物。

實(shí)驗(yàn)流程:

1. 實(shí)驗(yàn)前標(biāo)準(zhǔn)品、試劑及樣本的準(zhǔn)備；

2. 加樣（標(biāo)準(zhǔn)品及樣本）100μL，37°C孵育1小時(shí)；

3. 吸棄，加檢測溶液A100μL，37°C孵育1小時(shí)；

4. 洗板3次；

5. 加檢測溶液B100μL，37°C孵育30分鐘；

6. 洗板5次；

7. 加TMB底物90μL，37°C孵育10-20分鐘；

8. 加終止液50μL，立即450nm讀數(shù)。

試劑和樣本的控制方法：

一、試劑

1.試劑的選擇：國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴(yán)格把關(guān)，我司嚴(yán)格按照國家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行生產(chǎn)，已獲得國家承認(rèn)的“三證”，每一個(gè)產(chǎn)品都有對應(yīng)的生產(chǎn)批號，只要客戶提前下單，我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品，不必?fù)?dān)心會有過期的試劑。我司的試劑，值得您選擇。

2.試劑的準(zhǔn)備：先將試劑盒先從冰箱中拿出來，在室溫下放置20-30 min后，再進(jìn)行測定，使試劑盒在使用前與室溫平衡，這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達(dá)到所需的溫度，以滿足后面的測定需求。

二、樣本

1.內(nèi)源性干擾因素：包括類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、高濃度的非特異球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等；

類風(fēng)濕因子的控制方法：

①用F(ab)2替代完整的IgG；

②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理；

③檢測抗原時(shí)，可用2-巰基乙醇加入到標(biāo)本稀釋液中使RF降解。

檢測程序：

1.  加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品 100ul ，將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。

2.  洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次，向?yàn)V紙上印干。

3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。

4.  洗板：同前。

5.  每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。

6.  洗板：同前。

7.  每孔加入底物工作液100ul ，置 37   ℃ 暗處反應(yīng)15 分鐘。

8.  每孔加入100ul 終止液混勻。

9.  30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在 45 0 nm 處測 吸光值。

注意事項(xiàng):

1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。

3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間zui好控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。

4．  如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值），請先將樣本稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計(jì)算時(shí)請zui后乘以稀釋倍數(shù)（×5×n）。

5．  封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．本試劑不同批號組分不得混用。顯色劑B請避光保存。

7．嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

9. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準(zhǔn)

香菇 Lentinula edodes炭黑曲霉 Aspergillus carbonarius　　去甲腎上腺素(Noradrenaline) ELISA試劑盒通用96T31.2-2000 pg/mL大鼠母親DPP同源物4(Smad 4)ELISA試劑盒，英文名：Smad 4 ELISA Kit

真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基中慢生華癸根瘤 Mesorhizobium huakuii　　ELISA Kit for Human Normal mucosa of esophagus-specific gene 1 protein大鼠巨噬細(xì)胞移動抑制因子(MIF)ELISA試劑盒，英文名：MIF ELISA Kit

血管內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基K-562(慢性骨髓性白血病細(xì)胞)　　人2,5寡腺苷酸合成酶3(OAS3)ELISA試劑盒人96T0.78-50 ng/mL大鼠核因子κB抑制蛋白α(IKBα)ELISA試劑盒，英文名：IKBα ELISA Kit

異常漢遜酵母 Hansenula anomala釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae　　人磷脂酰肌醇-5-磷酸鹽4-激酶2γ型(PIP4K2C)ELISA試劑盒人96T78-5000 pg/mL大鼠催乳素(PRL)ELISA試劑盒，英文名：PRL ELISA Kit

球孢白僵 Beauveria bassiana尖孢鐮刀棉花?；?Fusarium oxyporium f. sp. vasinfectum　　人多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶1(PARP-1)ELISA試劑盒人96T0.625-40 ng/mL大鼠α肌動蛋白(α Actin)ELISA試劑盒，英文名：α Actin ELISA Kit

FO(小鼠骨髓瘤細(xì)胞)俄勒岡地鼠　　人含蛋白2激進(jìn)的S-腺苷甲硫氨酸域(RSAD2)ELISA試劑盒人96T0.78-50 ng/mL大鼠白細(xì)胞介素10(IL-10)ELISA試劑盒，英文名：IL-10 ELISA Kit

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae熱帶假絲酵母 Candida tropicalis　　人絲氨酸蛋白酶抑制劑A11(Serpin A11)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠心肌肌鈣蛋白T(TNNT2)ELISA試劑盒，英文名：TNNT2 ELISA Kit

東北擬青霉蛹蟲草 Cordyceps millitaris　　人突觸融合蛋白1A(STX1A)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠軟骨糖蛋白39(GP39)ELISA試劑盒，英文名：GP39 ELISA Kit

腺上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基小鼠小腸平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基　　人腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白3(TNF alpha-induced protein 3)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL大鼠激肽原1(KNG1)ELISA試劑盒，英文名：KNG1 ELISA Kit

HuH-7肝細(xì)胞心室肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基　　人腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(TRAIL)ELISA試劑盒人96T46.9-3000 pg/mL大鼠二氫硫辛酸轉(zhuǎn)乙?；?DLAT)ELISA試劑盒，英文名：DLAT ELISA Kit

MAPK絲裂原激活的蛋白激酶/MAP激酶檢測試劑盒ALF/GTF2A1LF  通用轉(zhuǎn)錄因子IIA樣因子抗體 規(guī)格: 0.1ml

ALG11  天門冬酰胺連接糖基化11抗體 規(guī)格: 0.2ml

ALK/CD246  間變型瘤激酶抗體 規(guī)格: 0.2mlPCDHGA3  原鈣粘蛋白γA3抗體 規(guī)格: 0.2ml

ALOX12/12 Lipoxygenase  12脂氧合酶抗體 0.1mlSubstance P  P物質(zhì)抗體 規(guī)格: 0.1ml

ALOX15/15 Lipoxygenase 1  花生四烯酸15脂氧合酶1抗體 規(guī)格: 0.2mlMouse Anti-Rabbit IgM/Cy5  Cy5標(biāo)記的小鼠抗兔IgM 規(guī)格: 0.1ml

ALOX15B/15 Lipoxygenase 2  花生四烯酸15脂氧合酶2抗體 規(guī)格: 0.2mlCKAP5/ch TOG  結(jié)腸和肝瘤高表達(dá)蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

ALOXE3  表皮型脂氧合酶3抗體（魚鱗病相關(guān)蛋白） 規(guī)格: 0.2ml

alpha 1 Spectrin/Spectrin α  影蛋白/收蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

Alpha 2 antiplasmin   α2纖溶酶色素上皮衍生因子抗體 規(guī)格: 0.2mlccnb1ip1  周期蛋白B1結(jié)合蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml

alpha Actinin 4  α-輔肌動蛋白4抗體 0.2ml