主營產(chǎn)品：
生化試劑，標準品,對照品，PCR試劑盒，?核酸檢測試劑盒，熒光定量檢測試劑盒，生化試劑盒?，比色法試劑盒，酶活性檢測試劑盒，ELISA試劑盒，酶聯(lián)免yi檢測試劑盒，試劑盒，ELISA試劑盒，抗體，重組蛋白，分光光度法檢測試劑盒，細胞株，原代細胞，細胞培養(yǎng)基，標準溶液產(chǎn)品。代理并銷售進口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產(chǎn)品。
熒光定量PCR熔解曲線解讀
日期：2025-05-09 04:11
瀏覽次數(shù)：46
摘要：
熔解曲線的解讀：
一般來說，根據(jù)引物設計原則，熒光定量PCR擴增產(chǎn)物長度在80~200 bp之間，對應的熔解溫度在80~90℃之間。
在陰性對照沒有擴增的情況下，可以根據(jù)熔解曲線驗證擴增產(chǎn)物的特異性：
1、熔解曲線在80~90℃之間出現(xiàn)唯1單峰，表明PCR產(chǎn)物特異性好。
2、熔解曲線出現(xiàn)雙峰，在80~90℃之間出現(xiàn)主峰，80℃以下（一般為60~75℃之間）出現(xiàn)雜峰，基本考慮產(chǎn)物中可能存在引物二聚體，可嘗試提高退火溫度、降低引物濃度、重新設計引物等方法解決。
3、熔解曲線出現(xiàn)雙峰，在80...
熔解曲線的解讀：
一般來說，根據(jù)引物設計原則，熒光定量PCR擴增產(chǎn)物長度在80~200 bp之間，對應的熔解溫度在80~90℃之間。
在陰性對照沒有擴增的情況下，可以根據(jù)熔解曲線驗證擴增產(chǎn)物的特異性：
1、熔解曲線在80~90℃之間出現(xiàn)唯1單峰，表明PCR產(chǎn)物特異性好。
2、熔解曲線出現(xiàn)雙峰，在80~90℃之間出現(xiàn)主峰，80℃以下（一般為60~75℃之間）出現(xiàn)雜峰，基本考慮產(chǎn)物中可能存在引物二聚體，可嘗試提高退火溫度、降低引物濃度、重新設計引物等方法解決。
3、熔解曲線出現(xiàn)雙峰，在80~90℃之間出現(xiàn)主峰，90℃以上又出現(xiàn)雜峰，基本考慮有非特異性擴增。若模板中有基因組DNA污染導致非特異性擴增，可通過跨內(nèi)含子設計引物或去除基因組DNA等方法解決。