基礎細胞培養基主要成分

日期:2024-07-19 11:05
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摘要: 基礎細胞培養基(Basal medium)主要包括199、MEM、RPMI-1640、DMEM、DMEM/F12等。主要成分是氨基酸、維生素、碳水化合物、無(wú)機鹽和其它一些輔助物質(zhì)。人工合成培養基使用時(shí)還需添加一定量的血清使細胞生長(cháng)和繁殖。 1、L-谷氨酰胺 (L-Glutamine):是細胞生長(cháng)的必須氨基酸,為培養的細胞提供重要的能量來(lái)源。脫掉氨基后,L-谷氨酰胺可作為培養細胞的能量來(lái)源、參與蛋白質(zhì)的合成和核酸代謝。L-谷氨酰胺在溶液中經(jīng)過(guò)一段時(shí)間后會(huì )降解,降解率隨保存溫度而變。L-谷氨酰胺的降解導致氨的形成,而氨對于一些細胞...

基礎細胞培養基(Basal medium)主要包括199、MEM、RPMI-1640、DMEM、DMEM/F12等。主要成分是氨基酸、維生素、碳水化合物、無(wú)機鹽和其它一些輔助物質(zhì)。人工合成培養基使用時(shí)還需添加一定量的血清使細胞生長(cháng)和繁殖。


1、L-谷氨酰胺 (L-Glutamine):是細胞生長(cháng)的必須氨基酸,為培養的細胞提供重要的能量來(lái)源。脫掉氨基后,L-谷氨酰胺可作為培養細胞的能量來(lái)源、參與蛋白質(zhì)的合成和核酸代謝。L-谷氨酰胺在溶液中經(jīng)過(guò)一段時(shí)間后會(huì )降解,降解率隨保存溫度而變。L-谷氨酰胺的降解導致氨的形成,而氨對于一些細胞具有毒性。


2、GLutaMAX:即谷丙氨酸二肽,部分培養基中會(huì )使用L-丙氨酰-L-谷氨酰胺二肽來(lái)代L-谷氨酰胺,此二肽在水溶液中極為穩定,可以在儲存、孵育和長(cháng)期培養過(guò)程中防止L-谷氨酰胺的降解和氨的積累 。


3、丙酮酸鈉:丙酮酸鈉可以作為細胞培養中的替代碳源,盡管細胞更傾向于以葡萄糖作為碳源,但是,如果沒(méi)有葡萄糖的話(huà),細胞也可以代謝丙酮酸鈉。


4、 HEPES:HEPES (4-羥乙基哌嗪乙磺酸)是一種常用的兩性離子緩沖液,在37℃下的pKa為7.3 。由于培養中細胞的生長(cháng)和代謝會(huì )導致培養基的環(huán)境pH值發(fā)生劇烈變化,因此,為了維持可以穩定培養細胞的環(huán)境,通常,大多數細胞的佳培養環(huán)境是pH7.2-7.4,HEPES的緩沖范圍恰好在pH6.8-8.2內,這對于細胞培養是有利的。與其他緩沖液 (例如PBS (磷酸鹽緩沖鹽水)和TRIS)相比,HEPES在維持細胞培養基的pH值方面具有更高的穩定性。


5、 酚紅:酚紅在培養基中被用來(lái)作為PH值的指示劑,用以持續監測培養液的酸堿度,在低PH值時(shí)酚紅使培養液呈黃色,而較高的PH值時(shí)使培養液呈紫色,PH值7.2~7.4時(shí)為紅色,適合細胞培養。但酚紅也有一些缺點(diǎn),研究表明酚紅可以模擬固醇類(lèi)激 素 (特別是雌激 素)的作用,因此在用到雌激 素敏感的細胞時(shí) (如乳腺組織),好使用不含酚紅的培養基。酚紅會(huì )干擾流式細胞分析時(shí)候的檢測。此外,一些無(wú)血清培養基的配方中若存在酚紅會(huì )干擾鈉-鉀平衡。