ELISA實(shí)驗(yàn)血清與血漿預(yù)處理

日期：2025-05-09 15:53
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摘要： 血清是ELISA實(shí)驗(yàn)zui 常用的樣本，其預(yù)處理也十分簡(jiǎn)單。使用無(wú)熱原無(wú)內(nèi)毒su 的試管或離心管采集血液樣本，將試管或離心管在室溫下放置2小時(shí)或4℃過夜，分離出血清（建議傾斜試管或離心管以擴(kuò)大液面的橫截面，使血清可以更大程度地分離出來）。2-8℃下以1000×g離心20分鐘，小心收集上清液（血清），立即進(jìn)行測(cè)定。建議在-20℃或-80℃下將收集的血清分裝保存，避免反復(fù)凍融。 在收集血液樣本的過程中應(yīng)避免溶血，因?yàn)榧t細(xì)胞在溶解時(shí)會(huì)釋放具有過氧化物酶活性的物質(zhì)，這種情況下，ELISA實(shí)驗(yàn)中將會(huì)出現(xiàn)非特異性顯色反應(yīng)，導(dǎo)致...

       血清是ELISA實(shí)驗(yàn)zui 常用的樣本，其預(yù)處理也十分簡(jiǎn)單。使用無(wú)熱原無(wú)內(nèi)毒su 的試管或離心管采集血液樣本，將試管或離心管在室溫下放置2小時(shí)或4℃過夜，分離出血清（建議傾斜試管或離心管以擴(kuò)大液面的橫截面，使血清可以更大程度地分離出來）。2-8℃下以1000×g離心20分鐘，小心收集上清液（血清），立即進(jìn)行測(cè)定。建議在-20℃或-80℃下將收集的血清分裝保存，避免反復(fù)凍融。

在收集血液樣本的過程中應(yīng)避免溶血，因?yàn)榧t細(xì)胞在溶解時(shí)會(huì)釋放具有過氧化物酶活性的物質(zhì)，這種情況下，ELISA實(shí)驗(yàn)中將會(huì)出現(xiàn)非特異性顯色反應(yīng)，導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果不準(zhǔn)確。另外，樣本還應(yīng)避免xi 菌污染，因?yàn)閤i 菌可能含有內(nèi)源性HRP，也會(huì)導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果不準(zhǔn)確。

            血漿使用含抗凝劑的采血管或離心管采集血液樣本，采集后30分鐘內(nèi)，2-8℃下以1000×g離心15分鐘，小心收集上清液（血漿）。建議在-20℃或-80℃下將收集的血漿分裝保存，避免反復(fù)凍融。樣本應(yīng)避免溶血或高血脂。常見的抗凝劑包括EDTA鈉鹽，肝素鈉，枸櫞酸鈉等。檢測(cè)前請(qǐng)仔細(xì)閱讀ELISA試劑盒說明書，查看該試劑盒針對(duì)抗凝劑是否有特殊要求。