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微生物菌種冷凍干燥保存注意事項
日期:2025-05-08 23:10
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摘要:微生物菌種冷凍干燥保存注意事項
其原理是首先將微生物冷凍,然后在減壓下利用升華現(xiàn)象除去水分。事實上,從菌體中除去大部分水分后,細胞的生理活動就會停止,因此可以達到長期維持生命狀態(tài)的目的。該方法適用于絕大多數(shù)微生物菌種(包括噬菌體和立克次氏體等)的保存。在進行冷凍干燥時,需注意以下事項:
1、冷凍干燥前的培養(yǎng)條件:首先檢驗菌種純度。一般地說,將待保存的微生物在營養(yǎng)豐富且容易增菌的培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)為宜;菌齡以達到對數(shù)生長期為好;若為有芽孢或孢子的微生物,則以芽孢和孢子形成以后進行保存為好;菌液濃度以高為好,如xi 菌應達到109~1010/mL。
2、菌株號碼等的標記:可在安瓶外側(cè)標記或在安瓶內(nèi)封入標簽。
3、安瓶的準備:將安瓶在2%HCl中浸泡過夜,自來水沖洗3次后,蒸餾水刷凈,干燥,塞棉塞,貼標簽,干熱滅jun 或溫熱滅jun后,60℃恒溫干燥。
4、添加保護劑:常用的保護劑有脫脂乳、12%蔗糖、加7.5%葡萄糖的普通肉湯以及加7.5%葡萄糖的血清等。甘油管保藏法:在5mL菌種保藏管中,將等體積的菌懸液和40%的甘油充分混勻后,于-20℃冰箱中保存。