產品詳情
  • 產品名稱:狗腸微血管內皮細胞

  • 產品型號:
  • 產品**:撫生
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簡單介紹:
狗腸微血管內皮細胞公司正在出售的產品:人肺巨細胞癌高轉移系;PGBE1 alpha 1腎上腺素能受體A抗體 Pro-MMP-1 ELISA Kit 基質金屬蛋白酶檢測試劑盒 5號染色體開放閱讀框42抗體 MCF-7-LUC-GFP-Puro雙標記的人乳腺癌細胞
詳情介紹:

培養(yǎng)方法與步驟:


①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內,影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺內進行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結締組織盡可能去除,然后將肝組織反復剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉,使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。

⑥觀察:細胞接種后一般幾個小時內即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細胞生長良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細胞,這時可進行傳代培養(yǎng)。




產品名稱

狗腸微血管內皮細胞

產品規(guī)格

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

組織來源

小腸組織

生長特性

貼壁培養(yǎng)

細胞形態(tài)

上皮樣 多角形細胞

分類

原代細胞

貨號

A01X2310

用途

僅供科研實驗

細胞特性:


1) 組織來源于實驗動物的正常小腸組織。

2) 細胞鑒定:vWF熒光染色為陽性。

3) 經鑒定細胞純度高于90%。

4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。

5) 細胞生長方式:上皮樣,多角形細胞,貼壁培養(yǎng)。

推薦培養(yǎng)基

我們推薦使用 Delf原代 內皮 細胞 培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。

細胞簡介:

小腸位于腹中,上端接 幽門 與胃相通,下端通過闌門與大腸相連。小腸與心互為表里。是食物消化吸收的主要場所,盤曲于腹腔內,上連胃幽門,下接 盲腸 ,全長約56米,張開有半個籃球大,分為十二指腸、空腸和回腸三部分。

微血管內皮細胞呈單層覆蓋于微血管表面,構成血管內外物質交換的一種重要屏障,是循環(huán)血流動力和血液中危險因素的主要靶點。

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原代細胞步驟


1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時間根據腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細胞濾網過濾細胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
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