
細胞簡介:

頸動脈存在于脊椎動物頸部的動脈。有頸外動脈和頸內(nèi)動脈,前者分布至頭頂部和顏面部,后者進入顱內(nèi)分布至腦和眼眶內(nèi)。血管發(fā)生一個主要因素是由于血管平滑肌細胞轉(zhuǎn)變成為了具有繁殖能力的表型。因此,對動脈血管平滑肌細胞的體外培養(yǎng)和研究可用來發(fā)現(xiàn)和確定新的血管的靶向方法。
組織來源 |
產(chǎn)品規(guī)格 |
貨號 |
用途 |
頸動脈組織 |
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 |
A01X2028 |
僅供科研研究實驗 |
細胞特性:
1)組織來源于實驗動物的正常頸動脈組織。
2)細胞鑒定:平滑肌肌動蛋白(α-SMA)熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細胞生長方式:長梭形細胞,不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 DELF 原代 平滑肌 細胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
實驗具體步驟:

(1)動物福利:小鼠麻醉犧牲/處死,或者斷頸處死;
(2)小鼠:可以將小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次,或者簡單粗暴的使用75%乙醇在燒杯中浸泡3min,然后轉(zhuǎn)移至無菌操作臺使用無菌吸水紙/棉花將酒精擦拭干凈;
(3)取出心臟組織:用眼科剪在鑷子的配合下打開腹腔,取出心臟組織,置于含有2X雙抗冰冷PBS的培養(yǎng)皿中;
(4)組織:在含有2X雙抗PBS中將心臟一分為二,充分洗滌里邊的血液,/3次,每次5min;
(5)破碎組織:使用眼科鉗或者剪刀,將心臟組織剪碎至1-3 mm3大小組織塊;(備注:如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml膠原酶Ⅰ于37℃聯(lián)合消化組織3-5 min,
利于后期細胞從組織塊中爬出來,同時能夠消除部分結(jié)締組織等)
(6)種植組織塊:將上述組織使用2X雙抗冰冷PBS洗滌3次,每次5min,然后使用完全培養(yǎng)基(含有1X雙抗)洗滌一次。經(jīng)過的心臟破碎組織塊經(jīng)過離心后,可以用細頭
鑷子將組織塊種植于培養(yǎng)皿中(備注:破碎組織塊可能還含有液體,可以在一個無菌培養(yǎng)皿底沾幾下,把液體);種植完成后,可以將培養(yǎng)皿正置3-5小時,然后更換培養(yǎng)皿的
蓋子正置放置過夜(也可以使用封口膜密閉培養(yǎng)皿在4℃正置過夜);

(7)培養(yǎng)基培養(yǎng):將組織塊中輕柔緩慢的加入完全培養(yǎng)基,然后在恒溫潮濕細胞培養(yǎng)箱(37℃,5% CO2)培養(yǎng)48h后觀察單個細胞從組織塊中爬出情況,一般3-5 day能夠達到傳代的爬出效率;
(8)貼壁細胞傳代:當(dāng)單個細胞從組織塊爬出面積在組織塊3-5倍,進行傳代,此時可以使用0.25% or 1/3 0.25% 胰蛋白酶消化組織塊爬出的細胞,消化時間根據(jù)正常細胞消化時間即可,當(dāng)然可以在消化過程中不斷管擦爬出細胞的皺縮情況,一旦達到消化完成(皺縮細胞≥70%)即可使用完全培養(yǎng)基終止消化。在吹打單個細胞時候,一定要輕柔/緩慢,不能吹打到組織塊,如果組織塊掉下來,大概率是不會再貼壁成功啦。根據(jù)細胞數(shù)量種植到對應(yīng)的培養(yǎng)皿/瓶中;
(9)鑒定:細胞在傳代至代、第五代、第十代時候可以將部分細胞進行鑒定,鑒定辦法包括:RNA-seq、western blot、qRT-PCR、RT-PCR、IF、流式細胞術(shù)等。實驗方法:
一、懸浮細胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料,可采用低速離心。經(jīng)離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層,這樣可根據(jù)需要收獲目的細胞。
二、實體組織材料的分離方法
對于實體組織材料,由于細胞間結(jié)合緊密,為了使組織中的細胞充分分散,形成細胞懸液,可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。其中,機械分散法的特點是簡便、快速,但對組織機械損傷大,而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。消化分離法是指把組織剪切成較小團塊(或糊狀),應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進一步使細胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動,使團塊膨松,由塊狀變成絮狀,此時再采用機械法,用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩,使細胞團塊得以較充分的分散,制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液,接種培養(yǎng)后,細胞容易貼壁生長。
公司正在出售的產(chǎn)品:
PPARβELISAkit
異檸檬酸脫氫酶gamma亞基抗體
IDH3G
白血病相關(guān)蛋白AHI1抗體
AHI1
組蛋白H3-K27乙酰化檢測試劑盒
人CA125elisa檢測試劑盒
大鼠CXC趨化因子配體16(CXCL16)elisa檢測試劑盒免費代測
小鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)elisa分析檢測試劑盒
苯甲酸肽水解酶β抗體
Meprin beta
1號染色體開放閱讀框131抗體
C1orf131
轉(zhuǎn)錄共激活因子TAZ抗體 Anti-TAZ
Rho家族GTP酶2抗體 Anti-RND2/Rho7
心臟特異性源盒轉(zhuǎn)錄因子NKX2.5抗體 Anti-Nkx2.5/Cardiac-specific homeobox 1
鳥苷酸轉(zhuǎn)換因子VAV1抗體 Anti-VAV1
腫瘤蛋白P53誘導(dǎo)蛋白11抗體
TP53I11
Dab2相互作用蛋白抗體
DAB2IP
基質(zhì)交感分子1抗體 Anti-STIM1
氧化固醇結(jié)合蛋白8抗體 Anti-ORP8
重組蛋白G抗體 Anti-Protein G
轉(zhuǎn)錄因子Tbx18抗體 Anti-TBX18
AF680標記的兔IgG
兔頸動脈平滑肌細胞大鼠硬脂酰輔酶A去飽和酶1(SCD1)elisa檢測試劑盒
轉(zhuǎn)基因玉米MON802品系基因檢測試劑盒
GCC protein; GCC1P; GCC88; Golgi coiled coil 1; Golgi coiled coil protein 1; GRIP and coiled coil domain containing 1; Peripheral membrane Golgi protein; GCC1_HUMAN.
兔頸動脈平滑肌細胞
雞真皮成纖維細胞
AsPC-1人胰腺導(dǎo)管腺癌細胞
SK-MEL-28人皮膚黑色素瘤細胞