培養(yǎng)方法與步驟：
①動物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺內(nèi)進行無菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁，并開始生長。如果無污染且細胞生長良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色，此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細胞，這時可進行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
小鼠前脂肪細胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
組織來源
脂肪組織
生長特性
貼壁
細胞形態(tài)
成纖維細胞樣
分類
小鼠原代細胞
貨號
A01X1904
用途
僅供科研實驗
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳3-5代左右
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞簡介：
小鼠前脂肪細胞分離自脂肪組織；脂肪組織主要由大量群集的脂肪細胞構(gòu)成，聚集成團的脂肪細胞由薄層疏松結(jié)締組織分隔成小葉；貯存的脂肪，在需要時可迅速分解成甘油和脂肪酸，經(jīng)血液輸送到各組織以供利用。它們影響胰島素敏感性、血壓水平、內(nèi)皮功能、纖溶活動及炎癥反應(yīng)，參與多種重要病理生理過程；脂肪組織已由過去單純作為能量儲存的器官而成為一個極其重要的系統(tǒng)。脂肪組織在體內(nèi)含有兩種主要的細胞：一種是在胞漿內(nèi)積聚脂滴的成熟脂肪細胞；另一種是雖未在胞漿內(nèi)積聚脂滴但有這種潛能的前脂肪細胞。前脂肪細胞呈梭形，有分裂和增殖的能力；成熟的脂肪細胞呈圓形，已經(jīng)失去了分裂及增殖的能力。由于前脂肪細胞是一類具有增殖和向脂肪細胞分化能力的特異化前體細胞，與肥胖有著非常密切的關(guān)系。前脂肪細胞是一種類成纖維細胞，在演變的過程中不斷吸收脂質(zhì)，終成為成熟的脂肪細胞。前脂肪細胞對外界機械損傷的抵抗力較強，可望成為軟組織缺損的有益填充物。
方法簡介：
公司實驗室分離的小鼠前脂肪細胞采用膠原酶消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實驗室分離的小鼠前脂肪細胞經(jīng)油紅O染色檢測，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠8異前列腺素F2α(8-iso-PGF2a)elisa檢測試劑盒免費代測
人催乳素誘導(dǎo)蛋白(PIP)elisa分析檢測試劑盒
甲羥戊酸激酶（mevalonate kinase）活性比色法
小鼠維生素D結(jié)合蛋白(DBP)elisa檢測試劑盒
大鼠巨噬細胞炎癥蛋白1α(MIP-1α/CCL3)elisa檢測試劑盒
小鼠腫瘤壞死因子β(TNF-β)elisa檢測試劑盒
大鼠尿苷二磷酸葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶1(UGT1)elisa檢測試劑盒
印度墨負性染色試劑盒
兔C－反應(yīng)蛋白CRPelisa檢測試劑盒
BCL2樣12含脯氨酸蛋白抗體 BCL2L12
CD20樣蛋白1抗體 CD20L1/MS4A4A
磷酸酶受體相互作用蛋白Liprin α4抗體 PPFIA4
磷酸二酯酶9A抗體 PDE9A
β晶體體蛋白A2抗體 CRYBA2
氨基末端激酶2重組兔單克隆抗體 JNK2/MAPK9
細胞色素B還原酶1抗體 CYBR1
細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD5抗體 SMAD5
LOC103437570抗體 LOC103437570
MGEA5抗體 MGEA5
人S100B蛋白單克隆抗體 Human S100B
溶質(zhì)載體家族23成員2抗體 SLC23A2
高爾基體膜相關(guān)蛋白5抗體 GOLGA5
谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶θ2抗體 GSTT2
整合素β1（CD29）重組兔單克隆抗體 Integrin beta 1
腫瘤排斥抗原gp96 1 變異體抗體 TRA1 variant
大鼠補體因子H(CFH)elisa分析檢測試劑盒
小鼠前脂肪細胞小鼠卷曲螺旋域結(jié)合蛋白80(CCDC80)elisa分析檢測試劑盒
綿羊elisa分析檢測試劑盒
Antiviral Protein Type II; Antiviral protein, type 2; AVP type II; AVP, type 2; CD 119; CD119; CD119 antigen; CDw119; FLJ45734; IFN gamma R alpha; IFN gamma R; IFN gamma R1; IFN-gamma receptor 1; IFN-gamma-R1; IFNG R1; IFNGR 1; IFNGR; IFNGR1; Immune interferon receptor 1; Immune interferon receptor for; INGR1_HUMAN; Interferon gamma receptor 1; Interferon gamma receptor alpha chain; Interferon gamma receptor alpha chain precursor.
小鼠乳腺成纖維細胞
兔前列腺成纖維細胞
SV40-MES-13小鼠腎小球系膜細胞
J774A.1小鼠單核巨噬細胞
原代細胞步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時間根據(jù)腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時，用 40μm 的細胞濾網(wǎng)過濾細胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。