
培養(yǎng)方法與步驟:
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內,影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺內進行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結締組織盡可能去除,然后將肝組織反復剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉,使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細胞接種后一般幾個小時內即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細胞生長良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細胞,這時可進行傳代培養(yǎng)。
產品名稱
兔三叉神經元細胞
產品規(guī)格
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
組織來源
三叉神經
生長特性
貼壁
細胞形態(tài)
神經元細胞樣
分類
兔原代細胞
貨號
A01X2210
用途
僅供科研實驗
培養(yǎng)信息:
包被條件:PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基:含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態(tài):神經元細胞樣
傳代特性:屬于終末分化細胞;屬于不增殖細胞群
消化液:0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔三叉神經元細胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞簡介:
兔三叉神經元細胞分離自三叉神經組織;三叉神經為粗大的混合性腦神經,含一般軀體感覺和特殊內臟運動兩種纖維。其特殊內臟運動纖維起于腦橋中段的三叉神經運動核,纖維組成三叉神經運動根,由腦橋基底部與腦橋臂交界處出腦,位于感覺根下內側,后進入三叉神經第3支下頜神經中,經卵圓孔出顱,隨下頜神經分支分布于咀嚼肌等。運動根內還含有三叉神經中腦核有關的纖維,主要傳導咀嚼肌的本體感覺。三叉神經內以軀體感覺神經纖維為主,這些纖維的細胞體位于三叉神經節(jié)(半月節(jié))內,該神經節(jié)位于顱中窩顴骨巖部的前面三叉神經壓跡處,為硬腦膜形成的美克爾腔包裹。三叉神經節(jié)由假單極神經元組成,其突集中構成了粗大的三叉神經感覺根,由腦橋基底部與腦橋臂交界處入腦,止于三叉神經諸感覺核,其中傳導痛溫覺的纖維主要終止于三叉神經脊束核;傳導觸覺的纖維主要終止于三叉神經腦橋核。三叉神經節(jié)細胞的周圍突組成三叉神經三大分支,即第1支眼神經、第2支上頜神經、第3支為下頜神經。從3大分支不斷分支分布于面部皮膚、眼及眶內、口腔、鼻腔、鼻旁竇的粘膜、牙、腦膜等,傳導痛、溫、觸等多種感覺。
方法簡介:
實驗室分離的兔三叉神經元細胞采用胰蛋白酶消化法結合神經元培養(yǎng)基培養(yǎng)、化學試劑抑制法篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
實驗室分離的兔三叉神經元細胞經β-Tubulin-Ⅲ熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
公司正在出售的產品:
小鼠補體因子B(CFB)elisa檢測試劑盒
神經元蛋白提取試劑盒50T
正常人體腎組織微粒體組分(5毫克/毫升)
糖原含量測試盒
大鼠維生素D3(VD3)elisa檢測試劑盒
小鼠二肽基肽酶4(DPP4/CD26)elisa檢測試劑盒
大鼠白介素-9(IL-9)elisa檢測試劑盒
三色(MGT) 染色試劑盒
人β內啡肽受體(β-EPR)elisa檢測試劑盒
線粒體鈣吸收蛋白單克隆抗體 CBARA1/MICU1
腺苷酸環(huán)化酶9抗體 ADCY9
癌胚抗原單克隆抗體(檢測) CEA(B5)
白細胞介素-13受體a1抗體 IL13RA1
CARD9單克隆抗體 CARD9
CD8重組兔單克隆抗體 CD8
細胞趨化因子CCL2抗體 CCL2
磷酸化KB抑制蛋白β抗體 Phospho-IKB beta (Ser23)
重組非洲豬瘟p72蛋白 ASFV p72
轉化生長因子β1結合蛋白1抗體 LTBP1
谷氨酸脫羧酶-65單克隆抗體 GAD65
果蠅GAPDH(內參)抗體 GAPDH (Fruit Fly, Loading Control)
MD-2蛋白抗體 LY-96/MD2
NADH氧化還原酶輔酶2抗體 NDUFA2
溶血磷脂酰甘油酰基轉移酶1抗體 LPGAT1
軟骨衍生形態(tài)發(fā)生蛋白1/GDF 5抗體 CDMP1
大鼠堿性鞘磷脂磷酸二酯酶(Alk-Smase)elisa檢測試劑盒
兔三叉神經元細胞小鼠微管蛋白β3(TUBB3)elisa檢測試劑盒
人β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)elisa分析檢測試劑盒
IFN alpha 7; IFN alpha J1; IFN alphaJ; IFN-alpha-7; IFN-alpha-J1; IFNA 7; IFNA J; IFNA7; IFNA7_HUMAN; Interferon alpha 7; Interferon alpha family, gene 7; Interferon alpha J; Interferon alpha J1; Interferon alpha-7; Interferon alpha-J; Interferon alpha-J1; LeIF J; OTTHUMP00000021136; OTTMUSP00000012102; RP23-139P14.26.
兔神經干細胞
小鼠腸神經膠質細胞
SW620人結直腸腺癌細胞
HCC-LM3人高轉移肝癌細胞
原代細胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時間根據腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細胞濾網過濾細胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。