培養(yǎng)方法與步驟：
①動物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺內(nèi)進行無菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結締組織盡可能去除，然后將肝組織反復剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁，并開始生長。如果無污染且細胞生長良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色，此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細胞，這時可進行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
兔腸微血管內(nèi)皮細胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
組織來源
腸
生長特性
貼壁
細胞形態(tài)
內(nèi)皮細胞樣
分類
兔原代細胞
貨號
A01X2071
用途
僅供科研實驗
培養(yǎng)信息：
包被條件：PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：內(nèi)皮細胞樣
傳代特性：可傳2-3代
消化液：0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔腸微血管內(nèi)皮細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞簡介：
兔腸微血管內(nèi)皮細胞分離自腸道組織；腸道指的是從胃幽門至的消化管。腸是消化管中長的一段，也是功能重要的一段。哺乳動物的腸包括小腸、大腸和直腸3大段。大量的消化作用和幾乎全部消化產(chǎn)物的吸收都是在小腸內(nèi)進行的，大腸主要濃縮食物殘渣，形成糞便，再通過直腸經(jīng)排出體外。腸道堪稱身體勞累的器官——每天不停地消化、吸收食物，以提供足夠的養(yǎng)分，其實它的功能還遠不止此——它還是機體內(nèi)大的微生態(tài)系統(tǒng)。微血管是極細微的血管，管徑平均為6-9μm，連于動、靜脈之間，互相連接成網(wǎng)狀。微血管壁薄，管徑較小，血流很慢，通透性大。其功能是利于血液與組織之間進行物質交換。其管壁主要由一層內(nèi)皮細胞構成，在內(nèi)皮外面有一薄層結締組織。另外還?？梢姷揭环N扁而有突起的細胞貼在微血管的管壁外面，稱為周細胞。
方法簡介：
實驗室分離的兔腸微血管內(nèi)皮細胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結合差速貼壁法、并通過內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測：
實驗室分離的兔腸微血管內(nèi)皮細胞經(jīng)CD31熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
公司正在出售的產(chǎn)品：
GGT1ELISAkit
六磷酸肌醇激酶2抗體
IHPK2
α-1-酸性糖蛋白2抗體
Alpha 1 acid glycoprotein 2
小鼠睪酮(T)elisa分析檢測試劑盒
大鼠12羥二十烷四烯酸(12-HETE)elisa分析檢測試劑盒
石蠟切片組織RyR受體蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒
犬E選擇素(SELE)elisa分析檢測試劑盒
ERK2結合睪丸蛋白1抗體
MICALCL
1號染色體開放閱讀框192抗體
C1orf192
腫瘤壞死因子配體超家族成員9抗體 Anti-TNFSF9/CD137L
RAS癌基因家族蛋白RAB40B抗體 Anti-RAB40B
活化T細胞核因子5蛋白抗體 Anti-NFAT5
氫離子轉運ATP合成酶A1抗體 Anti-V-ATPase A1
SEDL蛋白抗體
TRAPPC2
C型凝集素受體CLEC13A抗體
DCL-1
磷酸化S6核糖體蛋白抗體 (Ser240/244) Anti-Phospho-S6 Ribosomal Protein (Ser240/244)
螺旋轉錄因子OTP抗體 Anti-OTP
蛋白磷酸酶2A抑制劑1抗體 Anti-PHAP1
谷氨酰胺轉胺酶2抗體 Anti-Transglutaminase 2/TGase2
生物素化人IgG英文別名： Human Immunoglobulin IgG/Biotin
兔腸微血管內(nèi)皮細胞Human IgG / Biotin
HHLA3蛋白抗體
dynein, cytoplasmic, intermediate polypeptide 1; cytoplasmic dynein 1 intermediate chain 1; DH IC-1; dynein intermediate chain 1, cytosolic; cytoplasmic dynein intermediate chain 1; DC1I1_HUMAN; DYNC1I1; DNCI1; DNCIC1; Dynein cytoplasmic intermediate polypeptide 1.
兔成骨細胞
小鼠脊髓星形膠質細胞
NCI-H82人小細胞肺癌細胞
E0771小鼠髓樣乳腺癌細胞
原代細胞步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時間根據(jù)腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時，用 40μm 的細胞濾網(wǎng)過濾細胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。