培養(yǎng)方法與步驟：
①動物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺內(nèi)進行無菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結締組織盡可能去除，然后將肝組織反復剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁，并開始生長。如果無污染且細胞生長良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色，此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細胞，這時可進行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
人睪丸支持細胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
組織來源
睪丸組織
生長特性
貼壁
細胞形態(tài)
成纖維細胞樣
分類
人原代細胞
貨號
A01X1385
用途
僅供科研實驗
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞簡介：
人睪丸支持細胞分離自睪丸；睪丸支持細胞又稱Sertoli細胞，在體內(nèi)呈不規(guī)則的高錐體形，細胞基部附著在基膜上，頂部伸至曲精小管腔面。它是生精細胞的支架，為其提供必需的營養(yǎng)物質(zhì)，能合成與分泌雄結合蛋白，為其提供高濃度的雄環(huán)境等，還具有構成血-睪屏障，形成睪丸內(nèi)微環(huán)境，調(diào)節(jié)精子發(fā)生等功能。睪丸支持細胞是睪丸的主要組成細胞，能分泌多種生長因子和抑制因子，不僅可為精子提供營養(yǎng)支持和保護，也能對其他細胞，如胰島和神經(jīng)細胞提供營養(yǎng)支持，而且當其與胰島或神經(jīng)細胞共移植時，也能夠為這些細胞提供保護，提高植活率。因此，睪丸支持細胞在細胞移植中具有廣泛的應用前景。制備高活率的Sertoli不僅對Sertoli的基礎研究有重要價值，而且在精子發(fā)生等領域有重要意義。
方法簡介：
公司實驗室分離的人睪丸支持細胞采用膠原酶消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實驗室分離的人睪丸支持細胞經(jīng)Fas-L熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
公司正在出售的產(chǎn)品：
sIgAELISAKit
驢黃體生成素(LH)elisa分析檢測試劑盒
LH ELISA Kit
人登革熱(DF)抗體(IgG)elisa分析檢測試劑盒
HumanDFIgGELISAkit
大鼠胰高血糖素樣肽1(Glp-1)elisa檢測試劑盒
TNF ALPHA蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒
小鼠N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)elisa檢測試劑盒
caspase-2活性檢測試劑盒分光光度法 20T、50T、100T
JHDM1D蛋白抗體
JHDM1D
載脂蛋白L3抗體
APOL3
大鼠β-防御素(β-Defensins)elisa檢測試劑盒
小鼠生長分化因子3(GDF3)elisa檢測試劑盒
人Q熱科克斯體2(Q fever)抗體(IgG)elisa分析檢測試劑盒
組織CLK1激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）
RNA結合蛋白15抗體
RBM15
著絲粒蛋白K/FKSG14抗體
Centromere protein K
尿皮質(zhì)素抗體 Anti-Urocortin
原鈣粘蛋白γA5抗體 Anti-PCDHGA5
原鈣粘附蛋白α7抗體 Anti-PCDHA7
尿苷二磷酸葡萄糖脫氫酶抗體 Anti-UGDH/UDPGDH
Cy3標記的羊抗小鼠IgG H&L
人睪丸支持細胞Goat Anti-Mouse IgG H&L / Cy3
鋅指蛋白5抗體
Docking protein 3; DOK 3; DOK Like Protein; DOKL Pending; Downstream of tyrosine kinase 3; p62 DOK Like Protein; DOK3_HUMAN.
人骨骼肌細胞
小鼠腎近端小管上皮細胞
KB人口腔表皮癌細胞
Capan-2人胰腺癌細胞
原代細胞步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時間根據(jù)腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時，用 40μm 的細胞濾網(wǎng)過濾細胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。