
細(xì)胞系實(shí)驗(yàn)步驟:
?一、細(xì)胞培養(yǎng)準(zhǔn)備?:
?生物柜的使用?:確保所有接觸細(xì)胞的物品都在生物柜中通過紫外,防止污染?。
?培養(yǎng)皿和培養(yǎng)瓶?:提供細(xì)胞生長的環(huán)境,保持恒定的溫度(通常為37℃)?。
?培養(yǎng)基和血清?:特制的培養(yǎng)基包含各種營養(yǎng)物質(zhì),如糖、氨基酸和維生素,添加胎牛血清和雙抗以提供生長因子和防止污染?。
?二、細(xì)胞培養(yǎng)過程?:
?細(xì)胞接收與記錄?:記錄細(xì)胞系的相關(guān)信息,包括背景信息、傳代培養(yǎng)、冷凍保存等?。
?細(xì)胞形態(tài)觀察?:定期檢查細(xì)胞的形態(tài)和行為,確保細(xì)胞狀態(tài)健康,無污染?。
?細(xì)胞傳代?:當(dāng)細(xì)胞密度超過80%時(shí)進(jìn)行傳代,注意消化時(shí)間和條件,避免細(xì)胞損傷?。
三、?細(xì)胞系鑒定與維護(hù)?:
?細(xì)胞系鑒定?:通過STR圖譜確定細(xì)胞的遺傳特征,防止細(xì)胞系被誤認(rèn)或交叉污染?。
?細(xì)胞保存與管理?:定期進(jìn)行細(xì)胞冷凍保存,確保細(xì)胞的長期存活和可用性?。
本網(wǎng)站銷售的所有產(chǎn)品均不得用于人類或動(dòng)物之臨床診斷,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
商品屬性:
產(chǎn)品貨號(hào) |
AXB10683 |
凍存條件 |
無血清凍存液,液氮儲(chǔ)存 |
產(chǎn)品分類 |
人細(xì)胞系 |
產(chǎn)品種屬 |
人 |
生長特性 |
貼壁生長 |
細(xì)胞形態(tài) |
上皮細(xì)胞樣 |
英文名稱 |
HEK293-copGFP-puro |
組織來源 |
胚胎腎 |
商品介紹:
細(xì)胞別稱;HEK293-copGFP-puro;人胚腎細(xì)胞-綠色熒光蛋白標(biāo)記;人胚腎細(xì)胞-copGFP-puro
種屬來源;人
組織來源;胚胎腎
生長特性;貼壁生長
細(xì)胞形態(tài);上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞代數(shù);p3-p8
背景簡介;Luciferase HEK-293細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)螢光蛋白。該細(xì)胞株性狀穩(wěn)定,培養(yǎng)時(shí)不需要添加維持??捎米魑灩獾鞍谆钚詸z測中的陽性對(duì)照,也可用于活體動(dòng)物成像實(shí)驗(yàn)。該細(xì)胞通過慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶GFP基因。 HEK-293細(xì)胞是剪切過的人腺病毒5(Ad5)轉(zhuǎn)染的人胚腎細(xì)胞形成的永生化細(xì)胞,HEK-293細(xì)胞包含并表達(dá)轉(zhuǎn)染的Ad5基因。早期報(bào)道中指出,293 HEK-293細(xì)胞基因組中含有腺病毒5(Ad5)基因組的左側(cè)端和右側(cè)端的DNA,但是現(xiàn)在明確了只存在其左側(cè)端的DNA。經(jīng)過對(duì)Ad5的插入點(diǎn)的克隆測序發(fā)現(xiàn),Ad5的1-4344位線性核苷酸整合入293
[HEK-293]細(xì)胞19號(hào)染色體(19q13.2)。293 [HEK-293]細(xì)胞為人類腺病毒載體擴(kuò)的宿主,可表達(dá)異常的玻連蛋白的細(xì)胞表面受體,由整合素β1亞單位和玻連蛋白受體α-v亞單位組成。
生物等級(jí);2
細(xì)胞規(guī)格;1x106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝
支原體檢測;無
保藏機(jī)構(gòu);90% DMEM+10% FBS+PS+1. 0ug/ml
puro
培養(yǎng)基;ATCC; CRL-1573 ATCC: PTA-4488 DSMZ: ACC-305 ECACC: 85120602
培養(yǎng)條件;氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
凍存條件;無血清凍存液,液氮儲(chǔ)存
?公司正在出售的產(chǎn)品:
KCND1 嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白22抗體
CCL22 人丙酮醛(MGO)elisa分析檢測試劑盒
小鼠脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉(DPD)elisa檢測試劑盒 電壓門控鉀通道Kv4.1抗體
大鼠促甲狀腺素受體(TSHR)elisa檢測試劑盒 p53激活蛋白2抗體
FAM59B TBR1蛋白抗體 Anti-TBR1
植物脊髓過氧化酶(MPO)活性比色法定量檢測試劑盒 小鼠角化細(xì)胞因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)elisa檢測試劑盒
MYBBP1A FAM59B蛋白抗體
視黃醛脫氫酶2型抗體 Anti-RALDH2 核抑制蛋白磷酸酶1抗體 Anti-NIPP1/ARD1ZSWIM7 神經(jīng)肽Q抗體
人促生長釋放(GHRH)elisa生化檢測試劑盒 GHRHELISAKit
蛋白酪氨酸磷酸酶2抗體 Anti-SHP-2/PTPN11 ZSWIM7蛋白抗體
Neuropeptide Q 原基因18家族STMN3蛋白抗體 Anti-STMN3
核因子κB抑制蛋白β抗體 Anti-IKB beta Rho GTP酶激活蛋白29抗體 Anti-Rho GTPase activating protein 29
腫瘤壞死因子受體相互作用蛋白抗體 Anti-TRIP 大鼠凋亡相關(guān)因子(FAS)elisa分析檢測試劑盒
人胚腎細(xì)胞+copGFP;HEK293-copGFP-puroFAS ELISA Kit 山羊胞外超氧化物歧化酶[Cu-Zn](SOD3)elisa分析檢測試劑盒
植物脫落酸(ABA)elisa生化檢測試劑盒 ABA ELISA Kit
培養(yǎng)注意事項(xiàng) :
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時(shí)和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。
3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。
4. 貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞,再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,,用新鮮的完全培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?,個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時(shí)和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞 的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。
8. 備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請換用按照說明書細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。 收到細(xì)胞后次傳代建議 1:2 傳代 。
9. 注意: 1:2 傳代就是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè) T25 瓶或者 2 個(gè) 6cm 皿。不是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè)10cm 皿。