產品名稱：NP-69

商品屬性：

細胞培養(yǎng)操作：

1) 復蘇細胞：以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產品說明書為主。
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細胞及細胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進行細胞計數(shù)。
b、根據(jù)細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液，使細胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細胞懸液，注意凍存管做好標識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

商品詳情：

細胞別稱；NP69；人鼻咽上皮細胞

種屬來源；人

組織來源；鼻

生長特性；貼壁生長

細胞形態(tài)；上皮細胞樣

細胞代數(shù)；10代以內

細胞規(guī)格；1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝

支原體檢測；無

培養(yǎng)基；1）準備 角質細胞無血清培養(yǎng)基 (包含兩個組份：基礎培養(yǎng)基1瓶+生長因子1管：1mL或者5mL兩種）添加對應因子按照收到的生長因子對應規(guī)格：1mL加0.2%, 5mL 加1%，同時添加2%FBS ; 1% P/S 來培養(yǎng)細胞?；蛘?準備Defined K-SFM (part of kit NO:,10744-019)同時添加2% FBS ; 1% P/S  來培養(yǎng)細胞。備注: 1、Defined K-SFM (part of kit NO:,10744-019)培養(yǎng)液包含兩個組份：基礎培養(yǎng)基1瓶500mL+生長因子1管1mL. 2、由于角質細胞無血清培養(yǎng)基或者Defined K-SFM為無血清培養(yǎng)液無法終止胰酶消化，所以消化完成后要通過離心（建議125xg離心5到10分鐘）去除胰酶或者用帶10%血清的培養(yǎng)基來終止消化，再進行后續(xù)操作。

培養(yǎng)條件；氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃

凍存條件；無血清凍存液，液氮儲存

SCAND3       環(huán)磷酸鳥苷門控通道蛋白CNG4抗體

腦蛋白9抗體       KNDC1

著絲粒ZWILCH蛋白抗體  Anti-ZWILCH       SCAND3蛋白抗體

轉錄因子SOX17抗體  Anti-SOX17       衰老標記蛋白30抗體  Anti-Regucalcin/SMP30

絲氨酸/蘇氨酸激酶36融合同源蛋白抗體  Anti-STK36       非典型蛋白激酶C特定相互作用蛋白抗體  Anti-PAR3

B細胞轉錄激活因子抗體       BATF

NADPH氧化酶NOX家族的成員4抗體  Anti-NOX4/NADPH oxidase 4      CNGB1

前列腺特異性G蛋白偶聯(lián)受體/嗅覺受體51E2抗體  Anti-PSGR/OR52A2       踝蛋白抗體  Anti-Talin鋅指蛋白677抗體       ZNF677

載玻片細胞CASPASE-3蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒       磷脂酶C（PLC）測試盒

兔抗人IgG抗血清       Rabbit Anti-Human IgG H&L whole serum

雞凋亡相關因子(FAS)elisa生化檢測試劑盒       FAS ELISA Kit

小鼠白介素2受體β(IL2rb/CD122)elisa生化檢測試劑盒       Il2rb/CD122ELISAKit

魚卵黃高磷蛋白(PV)elisa生化檢測試劑盒       PV ELISA Kit

NP-69人補體因子H(CFH)elisa生化檢測試劑盒       HumanCFHELISAKit

小鼠G蛋白偶聯(lián)受體120(GPR120)elisa檢測試劑盒       可溶性淀粉合成酶(SSS）測試盒

細胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當顯微鏡下細胞形態(tài)和生長密度達到90%時，進行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細胞懸液吸至離心管內，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細胞，吹打細胞使其均勻分散。
（7）吸棄細胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。
（9）細胞凍存。