
細胞系實驗步驟:
?一、細胞培養(yǎng)準備?:
?生物柜的使用?:確保所有接觸細胞的物品都在生物柜中通過紫外,防止污染?。
?培養(yǎng)皿和培養(yǎng)瓶?:提供細胞生長的環(huán)境,保持恒定的溫度(通常為37℃)?。
?培養(yǎng)基和血清?:特制的培養(yǎng)基包含各種營養(yǎng)物質(zhì),如糖、氨基酸和維生素,添加胎牛血清和雙抗以提供生長因子和防止污染?。
?二、細胞培養(yǎng)過程?:
?細胞接收與記錄?:記錄細胞系的相關(guān)信息,包括背景信息、傳代培養(yǎng)、冷凍保存等?。
?細胞形態(tài)觀察?:定期檢查細胞的形態(tài)和行為,確保細胞狀態(tài)健康,無污染?。
?細胞傳代?:當細胞密度超過80%時進行傳代,注意消化時間和條件,避免細胞損傷?。
三、?細胞系鑒定與維護?:
?細胞系鑒定?:通過STR圖譜確定細胞的遺傳特征,防止細胞系被誤認或交叉污染?。
?細胞保存與管理?:定期進行細胞冷凍保存,確保細胞的長期存活和可用性?。
本網(wǎng)站銷售的所有產(chǎn)品均不得用于人類或動物之臨床診斷,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
商品屬性:
產(chǎn)品貨號 |
A01X831 |
凍存條件 |
詳見說明 |
產(chǎn)品分類 |
人細胞系 |
產(chǎn)品種屬 |
人 |
生長特性 |
貼壁生長 |
細胞形態(tài) |
星狀細胞 |
英文名稱 |
LX-2+GFP:LX2GFP |
組織來源 |
肝 |
商品介紹:
產(chǎn)品詳情
該細胞系由發(fā)表該細胞文章的作者命名,這個細胞又叫Lieming
Xu-2,這是一個永生化的細胞。
該細胞通過慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶GFP基因。
細胞特性
1) 來源:肝
2) 形態(tài):星狀細胞,貼壁生長
3) 含量:>1x10^6 細胞數(shù)
4) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
5) 用途:僅供科研使用。
細胞篩選
該細胞為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染GFP的細胞,隨細胞傳代次數(shù)的增加,其GFP熒光強度會逐漸減弱。若實驗要求需要維持熒光強度,可以加入嘌呤霉素進行再次篩選。
建議收到細胞后至少傳3代,凍存留種后再進行篩選。
初次進行細胞篩選時,建議加入終濃度為1ug/ml嘌呤霉素的培養(yǎng)基維持培養(yǎng),若無細胞漂浮或者漂浮較少,即可更換為含2ug/ml嘌呤霉素的培養(yǎng)基繼續(xù)篩選,以此類推,至高濃度為5ug/ml。若篩選過程中,漂浮細胞大于60%,則停止篩選,換成正常培養(yǎng)基培養(yǎng),至細胞密度約80%,可繼續(xù)加入同濃度嘌呤霉素進行篩選。當加入5ug/ml嘌呤霉素時細胞正常增殖,可停止篩選,用不含藥培養(yǎng)基正常培養(yǎng)。
?公司正在出售的產(chǎn)品:
細胞色素B561結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體 CYB561D1
痙攣性截癱相關(guān)蛋白21抗體 Anti-SPG21 磷酸化Runx3抗體 Anti-phospho-RUNX3(Ser338)
LOC83459蛋白抗體 LOC83459
精子相關(guān)抗原11A抗體 SPAG11A
5-羥色胺受體3D抗體 Anti-5HT3D Receptor 原鈣粘蛋白γC5抗體 Anti-PCDHGC5
G蛋白偶聯(lián)受體66/神經(jīng)調(diào)節(jié)肽U受體1抗體 Anti-NMUR1/GPR66 鋅指蛋白843抗體 Anti-ZNF843
14號染色體開放閱讀框抗體 MAPK1IP1L/C14orf32
泛素連接酶抗體 Anti-PIRH2 轉(zhuǎn)移生長因子β受體1抗體(TGF-βRⅠ,TGFβRⅠ) Anti-TGF Beta R1/TGFBR1G蛋白偶聯(lián)受體8抗體 GPCR GPR8
17號染色體開放閱讀框104抗體 C17orf104
FITC標記的小鼠IgM Mouse IgM / FITC
大鼠抗血小板抗體(IgM)elisa分析檢測試劑盒 Rat platelet antibody IgM ELISA kit
小鼠S100-B蛋白(S100B)elisa分析檢測試劑盒 S100BELISAkit
三碘甲狀腺原氨酸(T3)elisa分析檢測試劑盒 T3 ELISA Kit
LX-2+GFP人肝星形細胞+GFP人白介素37(IL-37)elisa分析檢測試劑盒 HumanIL-37ELISAKit
胰島素生長因子樣家族成員1抗體 IGFL1
培養(yǎng)注意事項 :
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細胞因子等,確保細胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。
3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分細胞由于溫度 變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后,75%酒精瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。
4. 貼壁細胞可以消化,懸浮細胞直接混勻收集細胞,900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細胞,再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,,用新鮮的完全培養(yǎng)基重懸 細胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細胞 的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細胞僅供科研使用。
8. 備注:運輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培 養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。 收到細胞后次傳代建議 1:2 傳代 。
9. 注意: 1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。